Purification de protéines
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Purification de protéines

Un plan de travail en purification de protéines nécessite habituellement de nombreuses étapes complexes. Bien qu’avoir les bons réactifs soit critique pour le succès, le bon équipement et les bonnes fournitures de labo peuvent aider à simplifier votre plan de travail et le rendre plus efficient et plus efficace. Ci-dessous, vous trouverez les étapes principales communément effectuées lors d’un plan de travail en purification de protéines, soulignant les endroits où le bon équipement de laboratoire peut faciliter votre travail.

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Lyse cellulaire

Une des premières étapes est celle de la lyse cellulaire afin d’accéder aux protéines. Selon le type de cellules, ceci se fait de façon mécanique ou chimique. Dans les deux cas, les protéines extraites sont délicates et il faut travailler soigneusement pour assurer le succès des étapes en aval.

 

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Chromatographie

La chromatographie des protéines les sépare selon leurs propriétés. Ceci permet la sélection et l’isolement des protéines cibles.

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Dialyse

La dialyse est une technique de séparation qui retire de la solution les composés indésirés plus petits pour conserver les protéines plus grosses. Les molécules diffusent des deux côtés d’une membrane sélective selon leur taille moléculaire.

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Essai

Une fois les substances interférentes retirées par les étapes de purification, vous pouvez maintenant quantifier et détecter la protéine cible à l’aide de différentes techniques, comme la fluorescence, la spectrophotométrie, ou la colorimétrie.

 

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Électrophorèses

L’électrophorèse sur gel peut être utilisée pour séparer les protéines, autant pour l’analyse que la purification. Une fois les protéines séparées, elles peuvent être utilisées pour les applications en aval comme les essais enzymatiques, davantage de purification, l’immunobuvardage, et l’élution et la digestion pour analyse par spectrométrie de masse.

Préparation des PCR
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Préparation des PCR

Préparer pour une expérience PCR réussie nécessite des échantillons, réactifs, et protocoles de réaction optimaux, mais les bons outils pour préparer votre expérience PCR peut aussi améliorer les résultats de réaction et augmenter la fiabilité de vos résultats. Ces outils peuvent fournir un meilleur assainissement de l’environnement de travail, le dégel et le mélange efficace d’échantillons et réactifs, le pipetage répété précis, exact et fiable des réactifs et échantillons, et des conditions améliorées d’entreposage.

De l’entreposage de vos échantillons et réactifs jusqu’à leur dégel, mélange, et traitement, le portfolio de produits SP Bel-ArtMC peut vous aider à obtenir des résultats fiables de PCR chaque fois. Par exemple, les protège-paillasses SP Bel-ArtMC LabMatMC peuvent absorber et contenir rapidement les déversements, et les flacons laveurs à grande ouverture et vaporisateurs à gâchette peuvent être utilisés avec les solutions d’eau de Javel afin de décontaminer les espaces de travail. Pour la distribution précise, exacte, et fiable d’échantillons lors de la préparation de PCR, vous pouvez utiliser une pipette à répétition, comme la SP Bel-ArtMC Roxy MMC et pipetter dans les seaux à glace et portoirs à tubes SP Bel-ArtMC Magic Touch 2MC qui aident à conserver les échantillons et réactifs à températures stables tout au long du processus.

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Assainissement

Les paillasses, l’équipement, et les appareils de laboratoire peuvent introduire la contamination provenant de préparations d’ADN faites au préalable. Puisque la PCR est une technique sensible et spécifique, une attention doit être portée à l’assainissement, la préparation, et l’organisation avant de commencer le travail de PCR.

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Dégel

Il est important de dégeler doucement les échantillons et réactifs qui contiennent des enzymes sensibles afin d’assurer une PCR réussie.

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Mélange

Un mélange adéquat assure que les produits chimiques nécessaires pour l’expérience PCR soutiennent et contribuent à la réaction.

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Entreposage de réactifs et échantillons

L’entreposage à long terme d’échantillons et de réactifs enzymatiques se fait à des températures sous le point de congélation.

Chromatographie

Chromatographie

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Séparer les molécules par chromatographie s’effectue dans de multiples domaines de la science et s’appuie sur le fractionnement réussi. À chaque étape du processus, les outils optimaux améliorent les chances d’une séparation très nette des composantes de vos échantillons.

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Préparation

Lors de la préparation de la colonne, il faut bien réfléchir à offrir la meilleure séparation d’échantillon. Considérez la polarité, la taille, et l’affinité de l’échantillon. La préparation est dictée par le type de chromatographie utilisée — analytique ou préparative.

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Faire fonctionner la colonne

Les colonnes doivent être configurées adéquatement afin de passer les échantillons de façon efficace. Des facteurs comme le chargement de la colonne ou s’assurer qu’elle est bien à la verticale peuvent faire une vaste différence pour la collecte d’échantillons.

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Collecte de fractions

La collecte de fractions varie selon la facilité à visualiser votre échantillon sur la colonne. Les meilleures pratiques dictent la collecte de nombreuses petites fractions qui peuvent être combinées une fois leur pureté confirmée.

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Nettoyage

Le nettoyage adéquat de la verrerie et du matériel en plastique permet d’avoir confiance en vos analyses ultérieures en utilisant la même méthodologie.