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Invitrogen™ SuperScript™ III Système de synthèse du premier brin

Numéro de catalogue. 18080051
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Description

Comprend

Oligo(dT)20 (50 μm), 50 μL; Hexamères aléatoires (50 ng/μL), 250 μL; Tampon RT 10X, 1 mL; 0,1M DTT, 250 μL; 25 mM chlorure de magnésium, 500 μL; 10 mM mélange dNTP, 250 μL; SuperScript III RT (200U/μL), 50 μL; RNaseOUT (40U/μL), 100 μL; E. coli RNase H (2U/μL), 50 μL; Eau traitée par DEPC, 1,2 mL; ARN HeLa total (10 ng/μL), 20 μL; Amorce de contrôle de détection (10 μm), 25 μL; Amorce antisens (10 μM), 25 μL

Le système de synthèse SuperScript III à première brin pour RT-PCR est optimisé pour synthétiser l’ADNc de première brin à partir de poly(A)+ purifié ou ARN total.

The SuperScript III First-Strand Synthesis System for RT-PCR is optimized to synthesize first-strand cDNA from purified poly(A)+ or total RNA. RNA targets from 100 bp to >12 kb can be detected with this system and the amount of starting material can vary from 1 pg to 5 μg of total RNA. SuperScript III Reverse Transcriptase is a version of M-MLV RT that has been engineered to reduce RNase H activity and provide increased thermal stability. The enzyme is used to synthesize cDNA at a temperature range of 42–55°C, providing increased specificity, higher yields of cDNA, and more full-length product than other reverse transcriptases. Because SuperScript III RT is not significantly inhibited by ribosomal and transfer RNA, it may be used to synthesize first-strand cDNA from a total RNA preparation.

Le système de synthèse SuperScript III à première brin pour RT-PCR est optimisé pour synthétiser l’ADNc de première brin à partir de poly(A)+ purifié ou ARN total. Des cibles d’ARN de 100 bp à >12 kb peuvent être détectées avec ce système et la quantité de matière de départ peut varier de 1 pg à 5 μg d’ARN total. SuperScript III Reverse Transcriptase est une version de M-MLV RT conçue pour réduire l’activité RNase H et offrir une stabilité thermique accrue. L’enzyme est utilisée pour synthétiser de l’ADNc dans une plage de température de 42 –à 55 °C, offrant une spécificité accrue, des rendements plus élevés d’ADNc et un produit plus long que d’autres transcriptases inverses. Comme le SuperScript III RT n’est pas significativement inhibé par l’ARN ribosomique et l’ARN de transfert, il peut être utilisé pour synthétiser l’ADNc de première brin à partir d’une préparation totale d’ARN.

Utilisation du système
SuperScript III à première ligneLa synthèse d’ADNcD est réalisée à la première étape en utilisant soit de l’ARN total, soit de l’ARN poly(A)+-sélectionné, amorcé avec oligo(dT), des amorces aléatoires ou une amorce spécifique à un gène. À la deuxième étape, la PCR est réalisée dans un tube séparé à l’aide d’amorces spécifiques au gène d’intérêt. Pour la réaction PCR, nous recommandons l’une des ADN polymérases suivantes : La polymérase à ADN de platine Taq offre des conditions de démarrage automatique à chaud pour une spécificité accrue jusqu’à 4 kb, la polymérase à ADN de platine Taq haute fidélité offre un rendement accru et une haute fidélité pour des cibles jusqu’à 15 kb, et la polymérase d’ADNPfx  de platine offre une fidélité maximale pour des cibles allant jusqu’à 12 kb.

Order Info

Conditions d’expédition : Glace sèche

Spécifications

Contenu et stockage

• Oligo(dT)20, 50 μL (50 μm)
• hexamères aléatoires, 250 μL (50 ng/μL)
• tampon RT 10X, 1 mL
• DTT, 250 μL (0,1 M)
• chlorure de magnésium, mélange dNTP de 500 μL (25 mM
•), 250 μL (10 mM)
• SuperScript III RT, 50 μL (200 U/μL),
• RNaseOUT 100 μL (40 U/μL)
• RNase H d’E. coli, 50 μL (2 U/μL)
• d’eau traitée à DEPC, 1,2 mL d’ARN HeLa total, 20
μL (10 ng/μL)
• amorce de détection de contrôle, 25 μL (10 μM)
• d’amorce antisens, 25 μL (10 μM)

à stocker à –20 °C. •
Format Kit
Performance de la PCR pour les régions riches en GC Élevée
Vitesse de réaction 50 min.
Technique Transcription inverse
Température de réaction optimale 50 °C
Quantité 50 rxns
Transcriptase inverse SuperScript III
Shipping condition (Condition d'expédition) Glace sèche
À utiliser avec (application) PCR en temps réel (qPCR), RT-PCR
Type de produit final ADNc simple brin
Nb de réactions 50 réactions
Format de réaction Composants distincts
Type de réactif Transcription inverse
Matériau de départ ARN
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Usage exclusivement réservé à la recherche. Ne pas utiliser dans des procédures de diagnostic.