Anticorps primaires

Les anticorps primaires, des immunoglobulines qui se lient à des protéines spécifiques ou à d’autres biomolécules, sont utilisés dans de nombreuses applications et protocoles de recherche pour détecter des cibles d’intérêt. Ils sont développés à l’aide de différents animaux hôtes, notamment la souris, le rat, le lapin, la chèvre, le mouton et de nombreux autres.

Anticorps monoclonaux et polyclonaux

Un type d’anticorps primaires, les anticorps monoclonaux, offre une reproductibilité élevée ainsi qu’une réactivité croisée et un bruit de fond faibles. Un autre type, les anticorps polyclonaux, coûtent souvent moins cher, offrent une plus grande affinité et une liaison plus rapide. Les deux sont produits à l’aide de lymphocytes B plasmatiques, mais le premier utilise le même clone et le deuxième utilise des clones différents. Les anticorps monoclonaux nécessitent des lignées cellulaires d’hybridome, ce qui n’est pas le cas des anticorps polyclonaux.

Il existe également des anticorps monoclonaux recombinants offrant des avantages similaires, notamment une affinité, une capacité de mise à l’échelle et une sensibilité élevées. Ils sont produits par clonage in vitro des lymphocytes B plasmatiques et à l’aide d’hôtes d’expression.

Anticorps primaires conjugués

Les anticorps peuvent être marqués avec divers fluorophores ou agents de détection, ou utilisés sans marqueurs. Les anticorps primaires marqués, également appelés anticorps primaires conjugués, aident les chercheurs à simplifier et à rationaliser leurs applications. Ils sont couplés à des enzymes et à des colorants courants, tels que l’Alexa Fluor, et sont souvent utilisés pour l’analyse des protéines et des cellules.

Applications

Les anticorps destinés aux applications en sciences de la vie sont utilisés pour la cytométrie en flux, le transfert Western, l’ELISA, l’immunohistochimie et l’immunocytochimie. Des anticorps secondaires peuvent être ajoutés pour favoriser la détection et la purification de certains antigènes. Ils se lient à l’anticorps primaire, qui lui-même se lie à l’antigène d’intérêt. Trouver la bonne combinaison d’anticorps peut offrir une plus grande spécificité pour l’antigène et un signal fort et détectable.