Thermo Scientific™ Ficin immobilisé (résine d’agarose)

La ficine, qui est similaire à la papaïne, est une protéase sulfhydryl non spécifique isolée du latex de figue. Le poids moléculaire de Ficin est d’environ 25 000 et il est efficace entre un pH de 4 et 9,5 avec un pH optimal de 6,5. Lorsque des molécules d'IgG sont incubées avec de la ficine en présence de cystéine, une ou plusieurs liaisons peptidiques dans la région de la charnière se divisent, produisant soit des fragments de Fab, soit des fragments de F(ab')2. L'IgG1 de la souris est particulièrement difficile à digérer en fragments fonctionnels de Fab ou F(ab')2 à l'aide de la papaïne ou de la pepsina, cependant, les rendements et l'immunoréactivité sont meilleurs lors de la digestion de l'IgG1 de souris avec de la ficine. Le ficin immobilisé a été spécifiquement conçu pour le clivage d'IgG1 de souris en fragments de Fab ou F(ab')2, et il est avantageux car il élimine pratiquement l'autolyse, élimine la contamination d'un échantillon avec la protéase et permet de contrôler la digestion en retirant la ficine ou en contrôlant le flux de l'échantillon sur une colonne de ficin immobilisée.

Points clés :

• Peut générer à la fois des fragments Fab et F(ab')2 à partir d'IgG1 de souris
• La réaction peut être facilement contrôlée
• Les fragments d’anticorps sont exempts de produits d’autodigestion
• La contamination par la ficine en fragments d’anticorps est éliminée