Invitrogen™ MC1061/P3 E. coli chimiquement compétente

MC1061/P3 Chimiquement compétent E. coli sont utilisés pour des transformations très efficaces qui nécessitent l’épisome P3 pour la sélection et le maintien de vecteurs codant pour le suppresseur d’ARNt de tyrosine (gène supF synthétique, tel que pCDM8, pcDNA1.1 ou tout autre vecteur contenant du supF).

Des cellules E. coli MC1061 ont été utilisées par Hanahan et ses collègues pour concevoir la DH10B souche. Parmi les gènes remplacés par l’ajout de mutations figuraient recA1 (inhibant le système de recombinaison homologue), l’extrémitéA1 et lacZΔM15. Ainsi, cette souche avec son système de recombinaison homologue intact est utilisée dans des applications où la recombinaison est nécessaire, comme dans l’ingénierie génétique d’E. coli par recombinaison ou recombinaison plasmide-phage.

MC1061/P3 Chimiquement compétent E. coli offre :
• Efficacités de transformation de >plasmide^{P3 de 1} x 10 8 cfu/μg•
pour la sélection deplasmides
• contenant F HSDR pour une transformation efficace de l’ADN non méthylé à partir d’amplifications

PCRplasmide
P3Le plasmide P3 est un plasmide à faible nombre de copies de 60 kb qui contient des marqueurs de résistance à la kanamycine, à la tétracycline et à l’ampicilline. Le gène de la kanamycine est pleinement actif et utilisé pour sélectionner les cellules porteuses de P3. Les gènes de tétracycline et d’ampicilline portent des mutations ambrées, qui rendent les gènes inactifs lors de la croissance et de la réplication normales de la bactérie. Lors de la transformation d’un vecteur porteur du gène suppresseur F, les mutations ambrées des gènes tétracycline et ampicilline sur le plasmide P3 sont supprimées, et les E. coli sont résistantes à ces antibiotiques.

Note : Le taux de réversion spontanée pour la mutation ambrée dans le marqueur ampicilline est de 5%, tandis que le taux de réversion pour la mutation ambrée dans le marqueur tétracycline est de 1%. Pour minimiser les taux de réversion, utilisez la tétracycline et l’ampicilline ensemble pour sélectionner les cellules d’E. coli (P3) transformées avec le plasmide de SupF.

Génotype
F^–hsdR(_{r K}–, m_K+) araD139 Δ(ara ABC-leu)7679 galU galK ΔlacX74 rpsL(StrR) ce mcrB / P3 : Kan^R Amp^R (am) Tet^R (am) Trouvez

la variété et le format qui correspondent à vos besoins
• Nous offrons des souches DH en formats de cellules chimiquement compétentes et électrocompétentes pour répondre à vos besoins spécifiques.
•  La variété TOP10/P3 (Cat. Non. C505003) pourrait être utilisé lorsque la recombinaison n’est pas nécessaire.
•  Les souches sont disponibles dans plusieurs MultiShot formats pour des applications à haut débit.