Thermo Scientific™ Uracile-ADN glycosylase (1 U/μL)

• Active dans les tampons Fermentas pour les enzymes de restriction et les polymérases thermophiles
• Source : cellules K12 d’E. coli
• Poids moléculaire : monomère de 25,6 kDa

• L’absence d’endo-, exodésoxyribonucléases, phosphatases et ribonucléases a été confirmée par des tests de qualité appropriés

Source :

• Cellules K12 d’E.coli

Poids moléculaire :

• Monomère de 25,6 kDa

Définition de l’unité d’activité :

• Une unité de l’enzyme catalyse la libération de 1 nanomole d’uracile à partir d’un gabarit d’ADN contenant de l’uracile en 60 minutes à 37 °C

• 30 mM Tris-HCl (pH 7,5), 150 mM NaCl, 1 mM EDTA, 1 mM DTT, 0,05% (v/v) Tween 20 et 50% (v/v) de glycérol

Tampon de réaction 10X :

• 200 mM Tris-HCl (pH 8,2 à 25 °C), 10 mM EDTA, 100 mM NaCl

• Inhibiteurs : Protéine Ugi du phage Bacillus subtilis PBS2, protéine p56 du phage Bacillus subtilis phi29 (7).
• Inactivé par chauffage à 95 °C pendant 10 minutes. L’activité enzymatique est partiellement rétablie à des températures inférieures à 55 °C. Donc, mettez les produits PCR sur la glace après la PCR et chargez directement sur un gel

Recommandé dans les domaines suivants :

Contrôle de la contamination par report en PCR (2); Détection de polymorphisme à nucléotide simple médiée par la glycosylase (GMPD) (3); Mutagenèse dirigée par le site (4); Comme sonde pour des études d’interaction protéine-ADN (5); le génotypage des SNP; Clonage de produits PCR (6); Génération de surplombs monobrin des produits PCR et de l’ADNc

Remarque :

Les sites abasiques formés dans l’ADN par l’Uracil-ADN Glycosylase peuvent ensuite être clivagés par la chaleur, le traitement alcalin ou des endonucléases qui se clivagent spécifiquement aux sites abasiques. L’UDG (UNG) est actif en présence ou en absence de cations divalents.