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Thermo Scientific™ T4 ARN Ligase (10 U/μL)

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Numéro de catalogue. FEREL0021 Fournisseur Thermo Scientific™ Code fournisseur EL0021

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Description

Catalyser la formation dépendante de l'ATP de liaisons phosphodiestères entre les terminaisons 5'-P et 3'-OH des oligonucléotides, de l'ARN simple brin et de l'ADN.

T4 L'ARN Ligase catalyse la formation intra- et intermoléculaire dépendante de l'ATP de liaisons phosphodiesters entre les extrémités du phosphate 5'-phosphate et du 3'-hydroxyle des oligonucléotides, de l'ARN simple brin et de l'ADN.

Le substrat minimal est un nucléoside 3',5'-biphosphate dans la réaction intermoléculaire et un oligonucléotide de 8 bases dans la réaction intramoléculaire.

  • Source : cellules d’E. coli avec un clone du gène 63 du bactériophage T4
  • Poids moléculaire : monomère de 43,6 kDa
Contrôle de la qualité :
  • L’absence de ribonucléases, exodésoxyribonucléases, endodésoxyribonucléases et phosphatases a été confirmée par des tests de qualité appropriés.
Source :
  • Cellules E. coli avec un gène cloné 63 du bactériophage T4

Poids moléculaire :

  • Monomère de 43,6 kDa

Définition de l’unité d’activité :

  • Une unité de l’enzyme catalyse la conversion de 1nmol de 5 pi-[32P]-(A)12-18 en une forme résistante à la phosphatase en 30 minutes à 37 °C
  • L'activité enzymatique est analysée dans le mélange suivant : 50 mM Tris-HCl (pH 7,5), 10 mMMgCl 2, 10 mM DTT, 1mM ATP, 10 μM 5'-[32P]-(A)12-18 (10 μM en 5ft.-termini)

Tampon de stockage :

  • L’enzyme est fournie en : 20 mM de Tris-HCl (pH 7,5), 1 mM de DTT, 50 mM de KCl, 0,1 mM d’EDTA, 0,03% (v/v) ELUGENT de détergent et 50% (v/v) de glycérol

Tampon de réaction 10X :

  • 500 mM Tris-HCl (pH 7,5 à 25 °C), 100 mMMgCl 2, 100 mM DTT, 10 mM ATP

Inhibition et inactivation :

  • Inhibiteurs : chélateurs métalliques, réactifs modificateurs du groupe SH (8).
  • Inactivé en chauffant à 70 °C pendant 10 minutes.

Recommandé dans les domaines suivants :

Marquage à l'extrémité ARN 3' avec le phosphate de cytidine 3',5'-bis [alpha-32P] (1); Relier l’ARN à l’ARN (2); Synthèse des oligoribonucléotides et des oligodéoxyribonucléotides (3, 4); Modifications spécifiques des ARNt (5); Ligature oligodésoxyribonucléotide avec des ADNc monobrin sur 5 pieds. RACE (Amplification rapide des extrémités de l’ADNc) (6); Génération spécifique au site d’amorces composites pour la PCR (7)

Remarque :

La concentration recommandée de BSA dans le mélange réactionnel est de 0,1 mg/ml.

Spécifications

Concentration 10 U/μL
Enzyme T4 ARN Ligase
Tampon compatible Tampon de réaction 10X
Quantité 1 000 unités
Type de produit T4 ARN Ligase

Usage exclusivement réservé à la recherche. Ne pas utiliser dans des procédures de diagnostic.