Thermo Scientific™ RNase H (5 U/μL)

• Elle n’hydrolyse pas les liaisons phosphodiester à l’intérieur de l’ADN et de l’ARN simple brin ou double brin

• L’absence d’endo-, d’exodésoxyribonucléases et de ribonucléases a été confirmée par des tests de qualité appropriés

Source :

• Cellules E.coli MRE-600

Poids moléculaire :

• Monomère de 18,4 kDa

Définition de l’unité d’activité :

• Une unité de l’enzyme catalyse la formation de 1nmol de produits acides solubles en 20 minutes à 37 °C
• L’activité enzymatique est analysée dans le mélange suivant : 20 mM de Tris-HCl (pH 7,8), 40 mM KCl, 8 mM_{MgCl 2}, 1 mM DTT, 24 μM [³H]-poly(A) ·poly(dT), 0,03 mg/mL de BSA, 4% (v/v) de glycérol

• L’enzyme est fournie dans : 25 mM de Hepes-Koh (pH 8,0), 50 mM de KCl, 0,1 mM d’EDTA, 1 mM de DTT, 0,1 mg/mL de BSA et 50% (v/v) de glycérol

Tampon de réaction 10X :

• 200 mM Tris-HCl (pH 7,8), 400 mM KCl, 80 mM_{MgCl 2}, 10 mM DTT

Inhibition et inactivation :

• Inhibiteurs : chélateurs métalliques, réactifs bloquant la SH
• Inactivé en chauffant à 65 °C pendant 10 minutes.

Recommandé dans les domaines suivants :

• Retrait de l’ARNm avant la synthèse de l’ADNc de second brin (1)
• RT-PCR et qRT-PCR : élimination de l’ARN après la synthèse de l’ADNc du premier brin
• Retrait des séquences poly(A) d’ARNm après hybridation avec oligo(dT) (2)
• Clivage spécifique à un site de l’ARN (3)
• Études sur les produits de réaction de polyadénylation in vitro