Thermo Scientific™ FastAP Phosphatase alcaline thermosensible (1 U/μL)

Faits saillants

• Enzyme recombinante
• Déphosphorylation  – rapide : 10 minutes à 37 °C
• Inactivation  – rapide et complète de 5 minutes à 75 °C
• Digestion et déphosphorylation simultanées de l’ADN vectoriel
• 100% actif dans les enzymes de restriction et les tampons PCR
• Un protocole pour tous les types d’ADN se termine :
  • 5-surplombs’
  • 3-surplombs’
  • extrémités émoussées
  • Nucléotides simples
• Nettoyage PCR en conjonction avec Exo I
• Déphosphorylation des protéines

Applications

• Déphosphorylation de l’ADN du vecteur clonant afin d’empêcher la recircularisation lors de la ligation
• Digestion et déphosphorylation simultanées de l’ADN vectoriel
• Nettoyage des produits PCR : Dégradation des nucléotidiques avant le séquençage du produit PCR
• Déphosphorylation des extrémités 5' des acides nucléiques avant le marquage avec la polynucléotide kinase T4
• D’autres applications où la déphosphorylation des substrats d’ADN et d’ARN est nécessaire
• Déphosphorylation des protéines

Note

• La liaison de FastAP la phosphatase alcaline thermosensible à l’ADN peut entraîner un décalage de bande dans les gels d’agarose. Pour éviter cela, incubez des échantillons avec une solution SDS 6X à 65 & °C à 65 °C pendant 10 minutes, puis laissez-les refroidir sur la glace avant l’électrophorèse.
• FastAP La phosphatase alcaline thermosensible est active dans tous les tampons enzymatiques de restriction et peut être ajoutée directement à l’ADN digéré. L’inactivation thermique de l’enzyme de restriction avant la réaction de déphosphorylation n’est pas nécessaire.