Thermo Scientific™ VitroEase™ Tampon de criblage et détergents

Le Thermo Scientific VitroEase kit de criblage tampon fournit des tampons et des détergents préformulés ainsi qu’une stratégie de criblage complète pour identifier les conditions optimales des protéines pour l’analyse d’échantillons cryo-EM à particule unique.

Les caractéristiques du VitroEase kit de filtrage tampon incluent :
• Facilité d’utilisation—14 tampons et 6 détergents préformulés à une concentration de 10 fois prêts, prêts à être ajoutés avec votre échantillon de protéines avec une dilution
• minimale Tampons et détergents pratiques—fournis avec des capsules codées par couleur correspondant à la stratégie
• de criblage codée par couleur Stratégie de criblage optimisée complète—comprenant deux cycles de criblage avec 24 grilles avec suggestions•
de dépannage Flexible—large gamme de tampons et de détergents courants pour la préparation d’échantillons cryo-EM, suffisants pour optimiser l’échantillon de 400 grilles.
• Composants validés—et stratégie de criblage validés par analyse

cryo-EM à particule unique. Le criblage cryo-EM des échantillons évalue le comportement des protéines dans divers tampons et conditions additives dans le but final d’identifier les conditions optimales dans lesquelles la protéine est stable, Orientés de façon aléatoire, et également répartis dans la glace. Les tampons de kit sont équipés de pH de 3,6 à 8,9 prémélangés avec divers sels et cations divalents. Les détergents sont fournis à des concentrations de 10 fois avec une table facile à utiliser pour convertir le volume en concentration CMC.

La stratégie complète de dépistage des échantillons utilise deux cycles de criblage et 24 grilles, prenant environ deux jours à traiter (figure ci-dessous). Lors du premier tour, les conditions optimales de concentration en protéines, de tampon et de pH sont déterminées. Dans la deuxième série, les détergents sont encore optimisés. Une stratégie condensée est également fournie en utilisant 8 grilles et prenant une journée de traitement, qui peut être utilisée lorsque peu d’échantillons est disponible ou pour des systèmes d’entrée latérale ou semi-automatisés de chargement d’échantillons, comme le Tundra Cryo-TEM.

Les stratégies de criblage recommandées sont conçues pour être utilisées avec les Thermo Scientific Vitrobot microscopes Mk4 et Krios, Glacios, Arctica avec des systèmes Autoloader et un multi-grillage EPU.