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Invitrogen™ LanthaScreen™ Kit d’essai coactivateur TR-FRET ER bêta
Description
- Le LanthaScreen™ kit de test bêta coactivateur ER TR-FRET offre une méthode sensible et robuste pour le criblage à haut débit des ligands bêta potentiels des récepteurs œstrogènes (RE) en tant qu’agonistes ou antagonistes du recrutement de coactivateurs dépendants du ligand. Le kit utilise un domaine de liaison au ligand bêta ER (ER bêta-LBD) marqué avec la glutathione-S-transférase (GST), un anticorps anti-GST marqué au terbium (Tb), et un peptide coactivateur marqué à la fluorescéine dans un format homogène de mélange et lecture.
- Mode agoniste – Pour exécuter le LanthaScreen test de coactivateur TR-FRET ER bêta en mode agoniste (pour identifier les composés agonistes), on ajoute de l’ER bêta-LBD aux composés de test des ligands, suivi de l’ajout d’un mélange de peptide fluorescéine coactivateur et d’anticorps Tb-anti-GST. Après incubation à température ambiante, le rapport d’émission TR-FRET 520:495 est calculé et utilisé pour déterminer l’EC50 à partir d’une courbe de réponse à la dose du composé. Basée sur la biologie de l’interaction peptide bêta-coactivateur RE, ce ligand EC50 est une valeur composite représentant la quantité de ligand nécessaire pour se lier au récepteur, provoquer un changement conformationnel et recruter un peptide coactivateur.
- Mode antagoniste – Lorsque le kit d’analyse LanthaScreen bêta coactivateur ER TR-FRET est utilisé en mode antagoniste (pour identifier les composés antagonistes), l’ER bêta-LBD est ajouté aux composés de test du ligand, suivi d’un mélange d’agoniste, de peptide fluorescéine coactivateur et d’anticorps Tb-anti-GST. La concentration d’agoniste utilisée dans ce mode est la concentration EC80 déterminée en effectuant d’abord le test en mode agoniste.
- Comprend :
- Protéine recombinante du domaine de liaison du ligand bêta ER à 1 tube (stockée à -68 à -85 °C)
- 1 tube de peptide (à conserver à -5 à -30 °C)
- 2 bouteilles tampon TR-FRET (à conserver à -5 à -30 °C)
- 1 flacon à cuillère à soupe d’anti-TPS (conserver à -5 à -30 °C)
- 1 tube de TDT (stocker à -5 à -30 °C)
Spécifications
Spécifications
| Contenu et stockage | 1 tube ER bêta protéine recombinante de liaison au ligand (conserver à -68 à -85 °C) 1 tube de peptide (conserver à -5 à -30 °C) 2 bouteilles tampon TR-FRET (conserver à -5 à -30 °C) 1 flacon Tb-Anti-GST Ab (conserver à -5 à -30 °C) 1 tube de DTT (conserver à -5 à -30 °C) |
| À utiliser avec (application) | Test d’interaction co-facteur, test des récepteurs nucléaires |
| Gamme de produit | LanthaScreen |
| Quantité | Analyses 800 x 20 μL |
| Catégorie | Trousse d’analyse coactivatrice |
Usage exclusivement réservé à la recherche. Ne pas utiliser dans des procédures de diagnostic.