Invitrogen™ TaqMan™ Cells-to-CT™ Express Kit

Le TaqMan kit Cells-to-CT Express est un système complet de lysat cellulaire conçu pour l’analyse de l’expression génique directement à partir de cellules cultivées sans purification d’ARN. Il permet un RT-qPCR de la plus haute sensibilité et du flux de travail le plus rapide en utilisant seulement cinq composants : Express Lysis Buffer, Express ezDNase, Express RT Master Mix, contrôles RT, et notre TaqMan meilleur Fast Advanced Master Mix. Le TaqMan kit Cells-to-CT Express offre la sensibilité dont vous avez besoin dans le flux de travail le plus rapide possible : Résultats RT-qPCR pour l’analyse d’expression génique en environ 70 minutes.

Les caractéristiques du TaqMan kit Cells-to-CT Express incluent :

• Facilité et vitesse—extraordinaires, 96 échantillons prêts pour RT-qPCR en aussi peu que 5 minutes
• Pas de purification—fastidieuse de l’ARN, pas de colonnes, de chauffage ou de centrifugation
• Les flux de travail vérifiés complètent—un ensemble de réactifs optimisés pour fonctionner efficacement dès la sortie de la boîte
• Écologique—, le kit est conforme au REACH, comporte moins de composants et nécessite moins d’étapes de pipetage, réduisant les coûts du plastique
• Des kits de taille adéquate pour l’automatisation—sont disponibles en taille de réaction 2500, incluant à la fois des composants de lyse et de RT

Chimie optimisée sans besoin de solution d’arrêt

L’analyse de l’expression génique à partir de la lyse cellulaire directe est simplifiée grâce à notre TaqMan kit Cells-to-CT Express. Avec une seule étape pour la lyse cellulaire et sans besoin d’ajouter une solution Stop, notre technologie Express permet un flux de travail rapide avec des résultats sensibles, précis et reproductibles. 10 –100 000 cellules sont lysées à l’aide de la solution de lyse expresse. L’inclusion optionnelle de ezDNase la solution de lyse express permet de retirer l’ADN génomique lors de la lyse cellulaire. Après une incubation de 5 minutes à température ambiante, le lysat est utilisé directement pour la transcription inverse à l’aide du SuperScript VILO IV Master Mix. Une fois la réaction RT terminée, l’analyse qPCR est effectuée à l’aide TaqMan d’un mélange master rapide avancé et d’un TaqMan test d’expression génique.

Flux de travail simplifié permettant des résultats rapides, précis et sensibles

L’ARN préparé à l’aide de la TaqMan technologie Cells-to-CT Express accélère et simplifie considérablement l’analyse de l’expression génique. Les lysats cellulaires présentent une sensibilité et une spécificité meilleures ou équivalentes à celles de l’ARN extrait selon les méthodes traditionnelles d’isolement de colonne de spin. La procédure de lyse prépare simultanément les lysats cellulaires pour la RT-qPCR et retire l’ADN génomique en seulement cinq minutes. L’étape de lyse est simple à automatiser avec des plateformes robotiques pour un traitement à haut débit de plaques de 96 ou 384 puits car elle se fait entièrement à température ambiante. La procédure est aussi économique, car il n’y a que quelques étapes de pipetage et, pour les cellules cultivées en plaques à 96 ou 384 puits, aucun transfert d’échantillon. Le SuperScript IV VILO RT Master Mix à haute efficacité transcrit même l’ARN le plus difficile (dégradé et peu abondant) tout en réduisant le temps de réaction typique de 10 minutes. De plus, le TaqMan kit Cells-to-CT Express est compatible avec plus de 700 000 TaqMan tests d’expression génique.

Maximiser la sensibilité de la détection

Contrairement à certains kits concurrents qui limitent la quantité de lysat dans la réaction RT à 10%, le TaqMan kit Cells-to-CT Express peut accueillir 45% du volume total de la réaction RT en tant que lysat cellulaire. De plus, l’ADNc peut représenter jusqu’à 45% du volume de réaction PCR en temps réel. Le grand volume de lysat dans la réaction RT optimisée, ainsi que le grand volume d’ADNc lors de la PCR en temps réel qui suit utilisant le TaqMan Fast Advanced Master Mix, conduisent à une sensibilité maximale. Le mélange maître amplifie la cible de façon précise et précise, permettant la détection de petites quantités de cible, telles que les transcriptions exprimées à bas niveaux.