Thermo Scientific™ Pierce™ Kit d’orientation IgG Plus Protéine A, 2 mL

Ces kits d’orientation IgG utilisent un réticulateur pour fixer covalentement l’anticorps lié à la protéine A ou à la résine agarose de la protéine G, créant ainsi une colonne d’affinité réutilisable pour la purification des antigènes. Les kits d’orientation Plus offrent une immobilisation par anticorps plus efficace et stable que la méthode traditionnelle d’orientation, car ils utilisent le réticulateur NHS-ester DSS (disuccinimidyl subérat) plutôt que le réticulateur imidoester DMP (diméthyle pimélimidate). Plusieurs milligrammes d’IgG peuvent être liés et réticulés à chaque colonne de 2 mL, après quoi la colonne d’affinité préparée peut être utilisée plusieurs fois pour la purification antigénique en utilisant des conditions typiques de liaison et d’élution.

La méthode d’immobilisation s’appelle orientation parce que les anticorps sont d’abord capturés dans la résine d’affinité par leurs régions Fc, qui sont les sites de liaison cibles des ligands de la protéine A et de la protéine G. Ainsi, les anticorps sont liés avec leurs sites de liaison à l’antigène orientés vers l’extérieur. Le réticulateur DSS réagit avec les amines primaires (chaîne latérale des résidus de lysine) de la protéine A/G et de l’anticorps lié à l’affinité, rattachant ainsi les protéines de façon covalente et permanente entre elles.

Points clés :

• La purification – des antigènes sans contaminants permet la purification des antigènes sans contamination (co-élution) des anticorps

• Immobilisation – covalente et résistante aux fuites, liaison à haute capacité d’IgG à la protéine A ou à la protéine G agarose, suivie d’un crosslinking efficace avec le réticulateur DSS

• Agarose – réticulée de haute qualité à 6% d’agarose perlée croisée avec la protéine A ou la protéine G recombinante

• Conditions – de liaison douce et de réticulation en couplage de l’anticorps dans le PBS standard

• L’immobilisation – orientée lie et relie l’IgG avec les sites de liaison antigénique dirigés vers l’extérieur, capables de capturer l’antigène passant en phase mobile sans entrave stérique

• Les kits – complets incluent tous les réactifs nécessaires pour immobiliser l’anticorps

• Mieux que le DMP–, moins de lixiviation d’anticorps que la méthode d’orientation traditionnelle avec le diméthyl pimelimidate en réticulation

Comprend :

Colonnes de protéines A ou G, subérat de disuccinimidyl (DSS), sachet PBS, tampon de blocage, tampon de liaison/lavage, tampon d’élution et accessoires de colonne