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Invitrogen™ No-Stain™ Réactif de marquage des protéines
Description
Le Invitrogen No-Stain réactif de marquage des protéines offre une méthode flexible, précise, rapide et fiable pour visualiser et normaliser les protéines dans un gel ou sur une membrane (après le transfert). Il forme des liaisons covalentes avec des protéines dans des gels ou sur des membranes en moins de 10 minutes, ne nécessite aucune étape de décoloration et peut être instantanément visualisé à l’aide de n’importe quel imageur couramment disponible. No-Stain Le réactif ne nécessite pas de gels particuliers ni d’autres réactifs et est compatible avec Gel Stains et les flux de travail occidentaux.
Visualisation instantanée des protéines dans les gels
Coomassie et d’autres étapes de tache et de détachement du gel peuvent être extrêmement longues et encombrantes. No-Stain Le réactif de marquage des protéines forme des liaisons covalentes avec les chaînes latérales lysine des acides aminés sur toutes les protéines dans un gel en moins de 10 minutes. Puisque la lysine est l’un des acides aminés les plus abondants, No-Stain le réactif permet de détecter toutes les protéines dans un gel ou sur une membrane, et l’émission forte de signal par le réactif lié covalentement offre une sensibilité au niveau des nanogrammes.
- L’alternative aux réactifs—colorants en gel traditionnels offre une normalisation plus précise sur une large plage de concentrations de lysat de protéines (1 –80 μg)
- Limite inférieure sensible—de détection de 20 ng par bande
- Des formes spécifiques—ne se lient qu’aux chaînes latérales de lysine des protéines. Le réactif non lié n’émet pas, ce qui permet un rapport signal sur bruit supérieur
- Flexible—, pas besoin de changer vos gels pour une commodité sans taches. No-Stain Le réactif offre une commodité sans taches avec n’importe quel type de gel (préfabriqué ou gel à verser soi-même)
Atteindre la référence pour le western blotting quantitatif
La normalisation des protéines est une étape cruciale pour obtenir un western blotting quantitatif fiable et reproductible. La normalisation totale des protéines est considérée comme la référence en matière de western blotting quantitatif. De nombreuses revues de premier plan ont élaboré des lignes directrices pour soumettre des recherches sur le western blotting, et des citations sélectionnées de ces lignes directrices sont fournies ci-dessous.
- « Pour des comparaisons quantitatives, des réactifs appropriés, des témoins et des méthodes d'imagerie avec des plages de signal linéaires doivent être utilisés » – Nature
- « Enregistrer comment les données ont été obtenues, si l'intensité du signal était linéaire par rapport à la charge antigénique, et comment la charge en protéines a été normalisée » – Journal of Biological Chemistry
- « Normaliser l'intensité du signal à la charge totale de protéines (évaluée en colorant les membranes pour la protéine totale) autant que possible » – Journal of Biological Chemistry
- « Les protéines ménagères ne devraient pas être utilisées pour la normalisation sans preuve que les manipulations n'affectent pas l'expression », – Journal of Biological Chemistry
Un contrôle de charge précis devrait montrer une relation linéaire entre l’intensité du signal et la charge de l’échantillon dans toutes les conditions expérimentales. L’intensité du signal obtenue par le marquage des protéines totales sur une membrane avec No-Stain un réactif assure une relation linéaire entre l’intensité du signal et la charge d’échantillon (voir figure ci-dessous) dans toutes les conditions expérimentales. Par conséquent, l’utilisation du No-Stain réactif dans les applications de western blot quantitatif permet l’utilisation de la protéine totale comme contrôle idéal de la charge.
- Protocole—facile à utiliser pour le marquage des protéines en moins de 10 minutes sur des membranes de nitrocellulose ou PVDF
- Visualisation rapide à l’aide d’une large gamme d’imageurs avec des sources lumineuses UV ou fluorescentes
- Normalisation—totale précise des protéines : la large plage linéaire de détection des protéines de 180 – μg permet de détecter le No-Stain signal en même temps que celui de votre protéine cible afin d’obtenir une normalisation totale précise des protéines
- Sensibilité sensible et stable—au niveau des nanogrammes avec un signal stable compatible avec les étapes ultérieures d’immunodétection
- Les—protéines d’analyse supérieure sont sensibles à la saturation du signal et à d’autres variations biologiques qui ne sont pas observées lors de l’utilisation No-Stain d’un réactif pour la normalisation totale des protéines
En savoir plus sur No-Stain le réactif de marquage des protéines ›
Spécifications
Spécifications
| Type de produit | Réactif de marquage des protéines |
| Shipping condition (Condition d'expédition) | Glace sèche |
| Compatibilité avec le gel | Tout type de gel et toute chimie du gel |
| Contenu et stockage | • No-Stain activateur, 800 μL, stocker à -20° • No-Stain C dérivé, 800 μL, stocker à -20• No-Stain °C tampon d’marquage (20X), 2 x 20 mL, stocker à 15 °C à 30 C° |
| Aperçu général | Le No-Stain réactif de marquage des protéines forme des liaisons covalentes avec les chaînes latérales des acides aminés lysines sur toutes les protéines |
| À utiliser avec (équipement) | Compatible avec une large gamme d’imageurs avec des sources lumineuses UV ou de fluorescence, par exemple, l’imageur iBright |
| Nb de réactions | 40 réactions |
| Durée de cycle | 10 minutes |
| Méthode de détection | Chimiluminescence, fluorescence |
| Compatibilité des membranes | Nitrocellulose, PVDF |
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Usage exclusivement réservé à la recherche. Ne pas utiliser dans des procédures de diagnostic.