Invitrogen™ Click-iT™ Essai HCS EdU Alexa Fluor™ 488

Le Click-iT test HCS EdU Alexa Fluor 488 est une alternative supérieure aux tests de prolifération traditionnels, optimisée pour des applications d’imagerie à fort contenu. Dans cet essai, l’analogue modifié de thymidine, EdU, est efficacement incorporé dans l’ADN nouvellement synthétisé et marqué fluorescentement avec un colorant brillant et photostable Alexa Fluor dans une réaction rapide et très spécifique par clic. Ce marquage fluorescent des cellules proliférantes est précis et compatible avec les méthodes d’anticorps grâce au protocole de clic léger. Réaction rapide et très spécifique au clic. Les méthodes de détection de la prolifération les plus précises reposent sur l’incorporation et la mesure d’analogues de nucléosides dans l’ADN nouvellement synthétisé, la bromodéeoxyuridine (BrdU) étant un analogue couramment utilisé. L’ADN marqué par BrdU est quantifié à l’aide d’anticorps anti-BrdU après une dénaturation de l’ADN par des méthodes agressives (HCl, chaleur ou enzymes) pour exposer les molécules de BrdU. Cette étape prend du temps et est difficile à exécuter de façon constante. Le traitement sévère peut aussi nuire à l’intégrité et à la qualité de l’échantillon, ce qui rend la co-coloration avec d’autres anticorps difficile.

• Simple : ça marche du premier coup, à chaque fois, en moins de temps
• Efficace : pas besoin d’étapes de dénaturation ni de traitement sévère
• Doucement sur les échantillons : meilleure préservation de la morphologie cellulaire, de la structure de l’antigène et de l’intégrité de l’ADN
• Cohérent : ne dépend pas de lots variables d’anticorps pour la détection
• Moins dangereux

Méthodologie
supérieure de prolifération Le Click-iT test HCS EdU Alexa Fluor 488 offre une alternative supérieure aux tests BrdU pour mesurer la prolifération cellulaire. EdU (5-ethynyl-2'-désoxyuridine) est un nucléoside analogue de la thymidine et est incorporé à l'ADN lors de la synthèse active de l'ADN. Avec Click-iT l’EdU, une fixation douce et la perméabilisation au détergent suffisent pour que le réactif de détection EdU Click-iT à base de petites molécules puisse accéder à l’ADN. Par conséquent, le Click-iT test EdU HCS est non seulement facile à utiliser, mais aussi plus précis et compatible avec l’analyse du cycle cellulaire et d’autres cibles intracellulaires ou extracellulaires pour des résultats véritablement riches en contenu.

• Le Click-iTassay peut être utilisé sur des cellules en culture ou in vivo après l’administration d’EdU, par méthode d’alimentation ou d’injection.
• Le Click-iTassay peut être utilisé avec BrdU dans des expériences à impulsions doubles en utilisant l’anticorps ant-BrdU (clone MoBu-1), qui ne réagit pas en croisement avec EdU.
• La technologie Click-iT est compatible avec les colorants immunohistochimiques, immunocytochimiques et fluorescents tolérants à la fixation ou conçus pour le marquage des cellules fixes.

Analyse cellulaire, cycle cellulaire, prolifération cellulaire, viabilité cellulaire, prolifération et fonction, imagerie cellulaire, réplication et réparation de l’ADN, criblage à haute teneur (HCS)