Invitrogen™ CellTracker™ Sondes fluorescentes

Les caractéristiques des CellTracker colorants incluent :

• Facile à utiliser—: retirer le milieu de culture, ajouter du colorant, incuber 15 à 45 minutes, et imager les cellules
• Excellente—rétention du signal fluorescent de >72 heures (typiquement trois à six générations)
• Les colorants—de suivi idéaux surveillent le mouvement, la localisation, la prolifération, la migration, la chimiotaxie et l’invasion cellulaires
• Une faible cytotoxicité—n’affecte ni la viabilité ni la prolifération
• La polyvalence– cellulaire fonctionne avec les cellules en suspension et en cellules adhérentes

Les CellTracker sondes fluorescentes ont été conçues pour traverser librement les membranes cellulaires; cependant, une fois à l’intérieur de la cellule, elles sont transformées en produits réactionnels imperméables à la cellule. Les CellTracker sondes de fluorescence (sauf Deep CellTracker Red) contiennent un groupe chlorométhyle ou bromométhyle qui réagit avec les groupes thiol, en utilisant une réaction médiée par la glutathion S-transférase –. Dans la plupart des cellules, les niveaux de glutathion sont élevés (jusqu’à 10 mM) et la glutathion transférase est omniprésente. CellTracker La sonde Deep Red contient un groupe ester succinimidyle réactif, qui réagit avec les groupes amine présents sur les protéines.

Après conversion en versions imperméables, les CellTracker sondes fluorescentes sont bien conservées dans les cellules vivantes à travers plusieurs générations. Les sondes sont transférées aux cellules filles, mais ne sont pas transférées aux cellules adjacentes d’une population. Les cellules chargées de sondes CellTracker fluorescentes affichent une fluorescence pendant au moins 72 heures et présentent des propriétés—idéales de colorant de suivi : elles sont stables, non toxiques à des concentrations de travail, bien conservées dans les cellules et fluorescentes vivement à pH physiologique. De plus, plusieurs CellTracker sondes fluorescentes avec divers spectres d’excitation et d’émission sont disponibles, permettant le multiplexage en imagerie fluorescente. Les CellTracker colorants sont conservés grâce à la fixation et à la perméabilisation, ce qui permet leur utilisation avec des anticorps pour des applications d’immunocoloration par fluorescence.

Caractéristiques spectrales des sondes fluorescentes CellTracker :

• CellTracker Blue CMAC—353/466 nm
• CellTracker Blue CMF2HC—371/464 nm
• CellTracker Blue CMHC—372/470 nm
• CellTracker Violet BMQC—415/516 nm
• CellTracker CMFDA—vert 492/517 nm
• CellTracker Vert BODIPY™—522/529 nm
• CellTracker CMTMR—orange 541/565 nm
• CellTracker CMR—orange 548/576 nm
• CellTracker CMTPX—rouge 577/602 nm
• CellTracker Rouge—profond 630/660 nm

Les réactifs fluorescents CellTracker incluent les dérivés chlorométhyle bleu-fluorescents de l’amino, hydroxy et difluorohydroxycoumarine (CMAC, CMHC et CMF2HC), les dérivés chlorométhyle fluorescents verts du diacétate de fluorescéine (CMFDA) et d’un BODIPY™ colorant, les CMTMR et CMRA fluorescents orange, ainsi que les CMTPX fluorescents rouges. CellTracker Blue CMAC, CMHC, et CMF2HC, Violet CellTracker , le dérivé bromométhyle violet-fluorescent de la coumarine (BMQC), CellTracker le CMTMR vert BODIPY™, CellTracker l’orange et CellTracker le CMTPX rouge ne nécessitent pas de clivage enzymatique pour activer leur fluorescence, tandis que le CMFDA vert et le CMRA orange nécessitent un clivage enzymatique. Les produits de réaction imperméables des coumarines chlorométhyl ou bromométhyl présentent une excellente rétention, une forte fluorescence et une coloration cytoplasmique relativement uniforme, ce qui rend ces dérivés potentiellement utiles pour corriger les artefacts de mouvement en imagerie. Le CMFDA est incolore et non fluorescent jusqu’à ce que les estérases cytosoliques se détachent des acétates, libérant un produit très fluorescent.

En plus d’une fluorescence brillante et d’une excellente rétention, les CellTracker sondes fluorescentes ne contribuent pas à la cytotoxicité.