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Thermo Scientific™ LightShift™ Kit EMSA chimiluminescent

Numéro de catalogue. PI20148
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Numéro de catalogue. PI20148 Fournisseur Thermo Scientific™ Code fournisseur LSG20148

Description

Identifier et caractériser les interactions de liaison protéine-ADN par l’EMSA avec ce système extraordinairement robuste et sensible.

Thermo Scientific™ LightShift Le kit EMSA chimiluminescent est un système extraordinairement robuste et sensible pour réaliser des essais de mobilité électrophorétique (EMSA) afin d’identifier et de caractériser les interactions de liaison protéine-ADN.

Le kit comprend des réactifs pour configurer et personnaliser les réactions de liaison protéine :ADN, un ensemble témoin d’extraits d’ADN et de protéine pour tester le système du kit, un conjugué stabilisé streptavidin-HRP pour sonder la cible d’ADN marquée à la biotine, ainsi qu’un module de substrat chimiluminescent exceptionnellement sensible pour la détection. Le principe de LightShift™ détection EMSA est similaire à celui d’un Western blot. L’ADN duplex marqué par l’extrémité de la biotine est incubé avec un extrait nucléaire ou un facteur purifié et électrophorisé sur un gel natif. L’ADN est ensuite rapidement (30 minutes) transféré à une membrane positive en nylon, reticulé par UV, sondé avec un conjugué streptavidine et HRP et incubé avec le substrat. Le protocole de l’étiquetage aux résultats peut être réalisé en une seule journée. Tout ce dont vous avez besoin pour effectuer le test, ce sont une cible d’ADN purifiée qui a été marquée par la biotine, l’extrait protéique que vous souhaitez tester, une membrane en nylon et un équipement d’électrophorèse de base. Les cibles d'ADN peuvent être synthétisées avec des marqueurs à biotine de 5' ou 3' ou être marquées après synthèse à l'aide du Thermo Scientific kit de marquage de l'ADN à l'extrémité de la biotine 3' (Partie no 89818). Des extraits de protéines nucléaires, cytosoliques ou à cellules entières peuvent être obtenus par diverses méthodes, y compris le Thermo Scientific NE-PER kit de réactifs d’extraction nucléaire et cytoplasmique (Partie no 78833).

Points clés :

  • Inclut un système de contrôle EBNA pour aider les nouveaux utilisateurs à développer un test fonctionnel et à comprendre les méthodes utilisées pour confirmer la spécificité des interactions de liaison
  • Excellent pour détecter les protéines à faible abondance dans les extraits nucléaires
  • Une sensibilité qui dépasse les méthodes radioactives et digoxigénines
  • Compatible avec des conditions de liaison déjà établies pour les interactions ADN :protéine populaires

Spécifications

Formulation

Kit multicomposantes avec réactifs pour les réactions de liaison ADN-protéine et la détection des blots
For Use With (Application) Tests de décalage de mobilité électrophorétique (EMSA) pour identifier et caractériser les interactions de liaison protéine-ADN
Includes LightShift Kit d’optimisation et de contrôle (20148X), 1 kit; Module de détection des acides nucléiques chimiluminescent (89880), 1 kit
No. of Reactions 100 réactions de liaison et détection sur 800 cm2 de membrane (10 mini-blots de gel)
Product Type LightShift Kit EMSA chimiluminescent