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Thermo Scientific™ LanthaScreen™ Kit de test coactivateur TR-FRET ER alpha
Description
Le LanthaScreen™ kit de test coactivateur alpha TR-FRET ER utilise un domaine de liaison au ligand alpha ER (ER alpha-LBD) marqué avec du glutathion-S-transférase (GST), un anticorps anti-GST marqué au terbium (Tb), et un peptide coactivateur marqué à la fluorescéine dans un format homogène de test mixte et lire.
Mode agoniste
Pour effectuer le LanthaScreen test coactivateur alpha TR-FRET ER en mode agoniste (pour identifier les composés agonistes), l’ER alpha-LBD est ajouté aux composés de test des ligands, suivi de l’ajout d’un mélange de peptide fluorescéine coactivateur et d’anticorps Tb-anti-GST. Après incubation à température ambiante, le rapport d’émission TR-FRET 520:495 nm est calculé et utilisé pour déterminer l’EC50 à partir d’une courbe de réponse à la dose du composé. Selon la biologie de l’interaction peptidique alpha-coactivateur RE, ce ligand EC50 est une valeur composite représentant la quantité de ligand nécessaire pour se lier au récepteur, provoquer un changement conformationnel et recruter le peptide coactivateur.
Mode antagoniste
Pour effectuer le LanthaScreen test coactivateur alpha TR-FRET ER en mode antagoniste (afin d’identifier les composés antagonistes), de l’ER alpha-LBD est ajouté aux composés testés des ligands, suivi d’un mélange d’agoniste, de peptide fluorescéine-coactivateur et d’anticorps anti-GST marqués au terbium (Tb). La concentration d’agoniste utilisée dans ce mode est la concentration EC80 déterminée en effectuant d’abord le test en mode agoniste.
Spécifications
Spécifications
| Contenu et stockage | 1 tube ER alpha Ligand Binding Domain Recombinant Protein (conserver à -68 à -85 °C) 1 tube de peptide (conserver à -5 à -30 °C) 2 bouteilles Tampon TR-FRET (conserver à -5 à -30 °C) 1 tube Tb-Anti-GST Ab (conserver à -5 à -30 °C) 1 tube de DTT (conserver à -5 à -30 °C) |
| À utiliser avec (application) | Test d’interaction co-facteur, test des récepteurs nucléaires |
| Gamme de produit | LanthaScreen |
| Quantité | Analyses 800 x 20 μL |
| Catégorie | Trousse d’analyse coactivatrice |
Usage exclusivement réservé à la recherche. Ne pas utiliser dans des procédures de diagnostic.