Invitrogen™ Zero Blunt™ TOPO™ Kit de clonage PCR pour séquençage, avec un Shot™ TOP10 E. coli chimiquement compétent

Chaque kit utilise le pCR™4Blunt-TOPO vecteur avec des sites d’amorce de séquençage spécialement conçus qui retournent plus de séquence d’insertion et moins de séquence vectorielle à partir de chaque réaction. Les kits incluent tout ce qu’il faut pour cloner et sélectionner des vecteurs recombinants contenant votre fragment PCR de choix.
Vecteur pCR4Blunt-TOPO : optimisé pour le
séquençage Nous avons retiré une grande partie du site de clonage multiple du vecteur pCR4Blunt-TOPO afin de raccourcir la distance entre les sites d’amorce de séquençage et le site d’insertion à aussi peu que 33 pb. Cela signifie que les réactions de séquençage donnent moins de séquence vectorielle et plus de séquence d’insertion. Le vecteur pCR4Blunt TOPO possède des sites pour quatre amorces de séquençage courantes : M13 en avant, M13 en arrière, T7 et T3. Les kits incluent une aliquote de chaque.
Sélection et manipulation
du clone pCR4Blunt-TOPOLe vecteur pCR4Blunt-TOPO contient à la fois des marqueurs de résistance à l’ampicilline et à la kanamycine ainsi qu’une fusion du gène LacZ-ccdBα pour une sélection positive et un criblage bleu/blanc. Le site de clonage multiple minimisé du vecteur inclut toujours des sites EcoRI adjacents pour une excision simplifiée des produits PCR clonés et un site unique Sse8387I pour la génération de suppressions imbriquées avant le séquençage. T7 et T3 des promoteurs sont également présents pour la transcription in vitro.
Clonage
simplifié basé sur TOPOGrâce à TOPO la technologie de clonage, il n’est pas nécessaire d’utiliser des amorces PCR contenant des séquences spécifiques, post-PCR des procédures, la préparation des vecteurs ou d’autres étapes longues de manipulation de l’ADN. Il suffit d’ajouter votre réaction PCR directement au vecteur chargé par la topoïsomérase fourni, d’incuber 5 minutes, puis de transformer les cellules compétentes fournies par E. coli.
Clonage
efficaceAvec jusqu’à 95% des clones portant l’insert désiré, vous pouvez filtrer moins de clones, ce qui vous fait gagner du temps et de l’argent. Le vecteur pCR4Blunt-TOPO utilisé dans ce kit ne comporte pas de surplombs pour une ligation efficace des produits PCR créés par la relecture, des polymérases thermostables qui laissent des produits PCR à extrémité émoussée.
La norme en clonage
En matière de clonage, TOPO la technologie du clonage est un partenaire fiable pour des milliers de scientifiques depuis plus de dix ans. Le clonage rapide, simple à utiliser et efficace TOPO a été appliqué à de nombreux vecteurs différents pour un large éventail d’applications.
Zero Blunt TOPO Kit de clonage PCR pour le séquençage : les formats
du kit : The Zero Blunt; TOPO Le kit de clonage PCR pour séquençage peut être acheté avec une variété de cellules compétentes qui offrent différents avantages selon vos besoins :

• Clonage général : TOP10 cellules (Cat. No. K2875-J10, K2875-20, K2875-40)
• Clonage à haute efficacité : TOP10 Electrocomp™ Cellules (cat. No. K2880-20, K2880-40)
• Clonage général, résistance au bactériophage T1 : DH5-T1Rα (Cat. Non. K2895-20)
• Croissance rapide : Mach1-T1™^{R E. coli chimiquement compétent (Cat. Non. K2835-20)}

Biologie de la chromatine, immunoprécipitation de la chromatine (ChIP), clonage, analyse de méthylation, clonage par PCR, ARNi, épigénétique et recherche sur les ARN non codants, séquençage de l’ADN traité au bisulfite