Invitrogen™ Dynabeads™ CD45

Dynabeads™ CD45 sont des billes superparamagnétiques couplées covalentement à l’anticorps anti-humain CD45 qui permettent l’isolement ou l’épuisement des leucocytes CD45⁺ directement à partir de suspensions de sang total, de couche buffy ou MNC. Dynabeads™ Le CD45 peut aussi être utilisé pour enrichir les cellules tumorales épithéliales. L’antigène CD45 est faiblement exprimé sur les cellules myéloïdes. Pour épuiser ou isoler efficacement tous les leucocytes, y compris les cellules myéloïdes, utilisez Dynabeads™ CD15 (Cat. No 11137D) en combinaison avec Dynabeads™ CD45. Avantages du Dynabeads™ CD45 :

• Déplétion efficace des leucocytes
• humains Isolement des leucocytes directement du sang total pour applications
• moléculaires Enrichissement des cellules

tumorales épithélialescirculantes Environ Dynabeads™ CD45
Dynabeads™ CD45 sont des billes superparamagnétiques uniformes (diamètre de 4,5 μm) recouvertes d’un anticorps monoclonal primaire IgG_2a de souris spécifique à un antigène membranaire CD45 commun à toutes les isoformes connues de CD45. CD45 est exprimé sur tous les leucocytes humains. En raison de la taille des biles, Dynabeads™ CD45 peut facilement et efficacement isoler ou épuiser les cellules à partir d’échantillons visqueux tels que le sang total et la moelle osseuse en environ 30 minutes. Dynabeads™ CD45 est souvent utilisé pour l’enrichissement des cellules tumorales circulantes non hématopoïétiques, par l’épuisement de tous les leucécytes CD45⁺ à partir d’un échantillon de CNM. Les cellules positivement isolées peuvent être utilisées pour des études moléculaires en aval; par exemple, celles dans lesquelles les cellules doivent être lysées tout en restant attachées à des billes, et où les acides nucléiques ou protéines sont purifiés davantage. Notez que les cellules intactes ne seront pas libérées de ces biles, et nous ne recommandons pas d’analyser les cellules liées aux billes avec un cytomètre en flux.

La séparation par billes –magnétiques offre une manipulation facile
Dynabeads™ CD45 est ajouté à l’échantillon sous un mélange continu afin d’optimiser la liaison des Dynabeads™ cellules cibles. En plaçant l’échantillon sur un aimant, il sépare les cellules cibles liées aux billes du reste de l’échantillon en seulement 1 –2 minutes. Pour l’épuisement, retirez le surnageant d’un nouveau tube pour des études plus approfondies et jetez les cellules liées aux billes. Pour une isolation positive lors des études moléculaires, retirez le surnageant et lavez les cellules liées aux billes 2 –à 3 fois dans un tampon pour obtenir une pureté optimale. Les cellules peuvent être lysées tout en restant attachées aux billes et le surnageant transféré dans un nouveau tube pour une analyse moléculaire en aval. Les échantillons de départ peuvent être du sang entier, du pelage buffy, de la moelle osseuse, de la PBMC ou de la digestion tissulaire.