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Invitrogen™ BLOCK-iT™ Kit de vecteur d’entrée ARNi U6
Description
Comprend
Le BLOCK-iT™ kit de vecteurs d’entrée U6 contient deux boîtes. La boîte de clonage contient quatre tubes de vecteur linéarisé à 5 ng/tube, suffisants pour effectuer 5 réactions de clonage par tube. Sont également inclus 250 μtampons de recuit L 10X, 20 μL T4 de ligase d’ADN, 80 μL de tampon de ligase ADN 5X, 1,4 nglac Z oligo, 10 μL de plasmide de contrôle Z en laclyophilisé, 1,5 mL d’eau sans DNase/RNase, et 2 μg chacun d’amorce de séquençage avant et inverse.
Un processus de clonage simple place un ADN oligonucléotidique d’environ 50 pb immédiatement après un promoteur de type U6 pol III. L’expression de cette cassette d’ARNi forme une molécule d’ARNsh dans la cellule qui sera traitée et agira comme un ARN interférant court (siRNA) générant l’effet ARNi.
Livraison de la cassette
U6 RNAiUne fois le clonage terminé, le vecteur d’entrée U6 est prêt à être utilisé immédiatement lors de transfections transitoires à l’aide d’un réactif comme Lipofectamine™ le 2000. Cela rend ce système idéal pour les criblages initiaux d’ARNsh dans de nombreux types cellulaires de mammifères. En alternative dans les types cellulaires difficiles à transfecter ou non divisés, ou pour être livrée à des systèmes modèles animaux, la cassette ARNi peut facilement être recombinée en un BLOCK-iT vecteur viral ARNi. Pour une livraison et une expression lentivirales de shRNA stables, recombinez le vecteur d’entrée BLOCK-iT U6 avec le pLenti6/BLOCK-iT vecteur ARNi. Pour une livraison transitoire à des types cellulaires difficiles par transduction adénovirale, recombinez-vous avec le pAd/BLOCK-iT vecteur ARNi. Représente une technique privilégiée pour analyser la régulation à la baisse des gènes.
Clonage, clonage passerelle, ARNi, ARNi, épigénétique et recherche sur l’ARN non codant, ARN à base de vecteurs
Spécifications
Spécifications
| Type de produit | Kit de vecteur d’entrée ARNi |
| Contenu et stockage | Le BLOCK-iT™ kit de vecteurs d’entrée U6 contient deux boîtes. La boîte de clonage contient quatre tubes de vecteur linéarisé à 5 ng/tube, suffisants pour compléter 5 réactions de clonage par tube. Sont également inclus 250 μl de tampon de recuit 10X, 20 μl T4 de ligase d’ADN, 80 μl de tampon de ligase ADN 5X, 1,4 ng lacZ d’oligo, 10 μl de plasmide de contrôle lacZ lyophilisé, 1,5 ml d’eau sans DNase/RNase, et 2 μg chacun d’amorce de séquençage avant et arrière. Stockez les vecteurs, tampons, oligo-oligo-plasmide de contrôle, l’eau et les amorces de séquençage à -20 °C. La boîte One Shot™ contient des réactifs de transformation, dont vingt-et-un aliquotes de 50-l μ de One Shot™ TOP10 Chemically Competent E. coli, un milieu S.O.C. et un plasmide de contrôle superenroulé pUC19. Conserver à -80 °C. Tous les réactifs sont garantis stables pendant 6 mois lorsqu’ils sont correctement stockés. |
| Méthode de clonage | Gateway™ |
| Système constitutif ou inductible | Constitutif |
| Type de livraison | Transfection |
| Type d’ARNi | ARNsh |
| Vector | BLOCK-iT Vecteurs ARNi |
| Promoteur | U6 |
| Format | Équipement |
| Gamme de produit | BLOCK-iT |
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Usage exclusivement réservé à la recherche. Ne pas utiliser dans des procédures de diagnostic.