Thermo Scientific™ HisPur™ Billes magnétiques Ni-NTA

Caractéristiques des HisPur billes magnétiques Ni-NTA :

• Capacité—équivalente à haute capacité ou capacité de liaison supérieure à celle des billes magnétiques Ni-NTA provenant d’autres fournisseurs
• Faible liaison—non spécifique, la surface du bille est pré-bloquée et le protocole fournit des tampons optimisés pour la purification
• Le protocole rapide—est complété en 1 heure
• Volumes d’échantillons de microlitres à millilitre de procédé—évolutifs
• Des protéines polyvalentes—purifient en utilisant des conditions natives ou dénaturantes
• Compatible—avec les réactifs peut être utilisé avec des réactifs de lyse cellulaire courants et une variété d’additifs tampons
• Plusieurs formats—de couplage protéique aux billes et aux applications en aval peuvent être effectués à la fois manuellement et sur une plateforme automatisée (par exemple, Thermo Scientific KingFisher Instruments)

La surface de billes magnétiques bloquées est dérivée avec la moitié de chélation de l’acide nitrilotriacétique (NTA) et chargée d’ions nickel divalents (Ni²⁺). Les billes de chromatographie d’affinité métallique immobilisée (IMAC) offrent une grande capacité de liaison avec un fond de fond très faible. Les HisPur billes magnétiques Ni-NTA peuvent être utilisées à la fois manuellement avec un support magnétique et avec des plateformes automatisées comme les Thermo Scientific instruments KingFisher pour des besoins à haut débit.

HisPur Les billes magnétiques Ni-NTA sont utilisées pour la purification d’affinité à petite échelle ainsi que pour le criblage à haut débit des protéines marquées par H recombinant. L’étiquette polyhistidine est la plus populaire et se compose généralement de six résidus d’histidine consécutifs (6xHis). Ces protéines marquées sont surexprimées dans plusieurs systèmes différents, le plus souvent chez les bactéries, et purifiées à partir de lysats cellulaires tels que ceux préparés à l’aide B-PER de réactifs d’extraction de protéines bactériennes. La purification des protéines marquées à Him est réalisée à l’aide d’un chélat NTA chargé de nickel qui coordonne avec les chaînes latérales d’histidine. Le chélat NTA contient quatre sites de liaison métallique qui permettent une lessivation d’ions à faible taux et une grande capacité de liaison. Le protocole pour les HisPur billes magnétiques Ni-NTA a été optimisé pour permettre une haute pureté de la protéine isolée marquée par His. La performance est équivalente ou supérieure à celle des billes magnétiques Ni-NTA provenant d’autres fournisseurs.