Invitrogen™ GeneArt™ Gibson Assembly EX Mélange maître

GeneArt Gibson Assembly EX Master Mix permet l’assemblage de l’ADN grâce à une technique qui permet de relier de façon fluide plusieurs fragments d’ADN chevauchés dans une réaction optimisée en deux étapes à tube unique. Des fragments d’ADN de différentes longueurs sont assemblés uniformément en utilisant des chevauchements complémentaires entre les fragments. La flexibilité et le succès inhérents à cette approche conviennent aux constructions d’ADN petits et grands, inclut à la fois des inserts simples et multiples, et a été utilisée pour construire des génomes entiers. Les produits résultants peuvent être utilisés pour diverses applications en aval, incluant la transformation, la PCR et l’amplification par cercle roulant (RCA). Le GeneArt Gibson Assembly EX kit Master Mix comprend le master mix, le contrôle positif et l’eau, et permet l’utilisation de vos propres cellules compétentes.

Les caractéristiques du GeneArt Gibson Assembly EX Master Mix incluent :

• Il—suffit d’assembler et de cloner sans effort jusqu’à 15 fragments d’ADN en une seule réaction
• Une efficacité robuste et efficace—permet des clones efficaces pour des constructions simples et complexes
• Des directives de conception flexibles—permettent d’assembler dans n’importe quel vecteur de votre choix
• Disponible pratique—sous forme de kits de mélange master et de clonage complets avec des cellules chimiques ou électrocompétentes
• A fait confiance—à plus de 4000 citations dans la littérature scientifique, soulignant un grand succès

Assemblage sans couture de jusqu’à 15 fragments

GeneArt Gibson Assembly EX Le clonage est un processus robuste, à tube unique, en deux étapes, où jusqu’à 15 inserts et vecteurs sont combinés dans un mélange enzymatique propriétaire afin d’assembler des fragments d’ADN avec une homologie terminale partagée sans laisser de séquences ou de cicatrices supplémentaires (sans couture). Une fois cette réaction doublement optimisée terminée, une partie de la réaction d’assemblage est ensuite transformée en cellules chimiquement compétentes ou électrocompétentes, produisant des clones prêts à être analysés le lendemain. L’homologie finale de paires de 20 à 40 bases requise est conçue dans le fragment de novo pour la synthèse ou peut être facilement ingénieurée par amplification PCR avec des oligos d’ADN personnalisés. Ce mélange enzymatique spécial crée une construction d’ADN fluide et liée covalentement, offrant une grande efficacité.

Méthode robuste pour une efficacité maximale

En raison du produit final lié covalentement, la GeneArt Gibson Assembly EX méthode permet l’utilisation de cellules chimiquement compétentes ou électrocompétentes pour obtenir la plus haute efficacité de transformation, ce qui est particulièrement important pour les constructions complexes. Il n’y a pas besoin d’enzymes de restriction, de sites de ligation ou de recombinaison, et la méthode offre une construction parfaitement fluide sans bases supplémentaires indésirables.

Offre une grande polyvalence

La GeneArt Gibson Assembly EX méthode offre de la polyvalence, peut simplifier de nombreuses techniques grâce à la combinaison rapide, l’addition, la suppression ou l’échange de segments d’ADN, et élimine le besoin de sous-cloner, économisant ainsi du temps et des efforts dans le flux de travail du clonage.