Thermo Scientific™ PvuII, HC (50 U/μL)

5'... C A G▵C T G... 3'

3'... G T C▵G A C... 5'

Conditions pour une activité à 100%

• 1x Tampon G : 10 mM Tris-HCl (pH 7,5 à 37 °C), 10 mM_{MgCl 2}, 50 mM NaCl et 0,1 mg/mL de BSA
• Incubez à 37 °C

Tampon de stockage

• Le PvuII est fourni en : 10 mM de Tris-HCl (pH 7,4 à 25 °C), 100 mM de KCl, 1 mM de DTT, 1 mM d’EDTA, 0,2 mg/mL de BSA et 50% (v/v) de glycérol

Ligature et reclivage

• Après une surdigestion de 10 fois avec PvuII, plus de 90% des fragments d’ADN peuvent être ligés et plus de 95% peuvent être recoupés

Effets de méthylation

• Dam : ne se chevauche —jamais, aucun effet
• Dcm : jamais de —chevauchement sans effet
• CpG : jamais de —chevauchement sans effet
• EcoKI : jamais de chevauchement —sans effet
• EcoBI : effet de chevauchement —possible non déterminé

Digestion de l’ADN incrusté dans l’agarose

• Un minimum de 5 unités de cette enzyme est nécessaire pour la digestion complète de 1 μg d’ADN lambda incrusté dans l’agarose en 16 heures

Remarque :

Une surdigestion supérieure à 15 fois avec le PvuII peut entraîner une activité stellaire.