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Thermo Scientific™ PdiI (NaeI) (10 U/μL)

Numéro de catalogue. FERER1522
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FERER1522 1 000 unités
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Numéro de catalogue. FERER1522 Fournisseur Thermo Scientific™ Code fournisseur ER1522

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Description

L’enzyme de restriction PdiI (NaeI) reconnaît les sites GCC^GGC et se découpe mieux à 37 °C dans le tampon Tango (Isoschizomères : MroNI, NaeI, NgoMIV).

ADN pBR322 digéré avec PdiI (NaeI), 0,7% d’agarose, 4 sites de clivage

Les endonucléases de restriction conventionnelles constituent un vaste ensemble d’enzymes de restriction de haute qualité, optimisées pour fonctionner dans l’un des tampons du système à cinq tampons. De plus, le tampon universel Tango est fourni pour faciliter la double digestion. Toutes les enzymes présentent une activité de 100% dans les conditions tampons et réactions recommandées. Pour assurer une performance constante, les Thermo Scientific tampons de réaction enzymatique de restriction contiennent des BSA prémélangés, ce qui améliore la stabilité de nombreuses enzymes et lie les contaminants présents dans les préparations d’ADN.

5'... G C C▵G G C... 3'

3'... C G G▵C C G... 5'

Conditions pour une activité à 100% :

  • 1X Tango tampon : 33 mM Tris-acétate (pH 7,9 à 37 °C), 10 mM Mg-acétate, 66 mM K-acétate et 0,1 mg/mL de BSA
  • Incubez à 37 °C

Tampon de stockage :

  • Le PdiI est fourni en : 10 mM de Tris-HCl (pH 7,5 à 25 °C), 500 mM de KCl, 1 mM de DTT, 0,1 mM d’EDTA, 0,2 mg/mL de BSA, 0,15% Triton X-100 et 50% (v/v) de glycérol

Ligature et reclivage :

  • Après une surdigestion multipliée par 50 avec PdiI, plus de 90% des fragments d’ADN peuvent être ligés et recoupés

Effets de la méthylation :

  • Dam : ne se chevauche —jamais, aucun effet
  • Dcm : jamais de —chevauchement sans effet
  • CpG : se chevauche —complètement bloqué
  • EcoKI : jamais de chevauchement —sans effet
  • EcoBI : jamais de chevauchement —sans effet

Digestion de l’ADN incorporé dans l’agarose :

  • Un minimum de 20 unités de cette enzyme est nécessaire pour la digestion complète de 1 μg d’ADN pBR322 incorporé dans l’agarose en 16 heures

Remarque :

Certains sites dans pBR322 sont difficiles à fusionner avec PdiI, tout comme pour son prototype NaeI

Testé à partir de l’ADN pBR322 (#SD0041)

Spécifications

Concentration 10 U/μL
Sensibilité à la méthylation CpG sensible à la méthylation, Pas sensible à la méthylation du barrage, Non sensible à la méthylation du DCM
Enzyme PdiI (NaeI)
Tampon compatible Tango tampon 10X
Sensible à l’inactivation par la chaleur Oui
Température de réaction optimale 37 °C
ER de type IIS Non
Quantité 1 000 unités
Type de produit Restriction Enzyme
Catégorie de recherche Clonage traditionnel

Usage exclusivement réservé à la recherche. Ne pas utiliser dans des procédures de diagnostic.