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Thermo Scientific™ FspBI (BfaI) (10 U/μL)
Description
ADN lambda digéré avec FspBI (BfaI), 0,7% d’agarose, 13 sites de clivage
Les endonucléases de restriction conventionnelles constituent un vaste ensemble d’enzymes de restriction de haute qualité, optimisées pour fonctionner dans l’un des tampons du système à cinq tampons. De plus, le tampon universel Tango est fourni pour faciliter la double digestion. Toutes les enzymes présentent une activité de 100% dans les conditions tampons et réactions recommandées. Pour assurer une performance constante, les Thermo Scientific tampons de réaction enzymatique de restriction contiennent des BSA prémélangés, ce qui améliore la stabilité de nombreuses enzymes et lie les contaminants présents dans les préparations d’ADN.
Plus de 80% des fragments d’ADN digérés peuvent être ligés et plus de 95% peuvent être redécoupés dans un mélange réactionnel contenant 20 à 40 U de T4 ligase d’ADN/1 μg de fragments et 10% de PEG à une concentration de 5 pieds-terminales de 0,13 μM après une surdigestion de 50 fois (3 U/μg d’ADN x 17 heures) avec BfuI FspBI (BfaI).
5'... C▵T A G... 3'
3'... G A T▵C... 5'
Conditions pour une activité à 100% :
- 1X tampon Tango™ : 33 mM Tris-acétate (pH7,9 à 37 °C), 10 mM Mg-acétate, 66 mM K-acétate et 0,1 mg/mL de BSA
- Incubez à 37 °C
Tampon de stockage :
- FspBI est fourni en : 10 mM de Tris-HCl (pH 7,4 à 25 °C), 100 mM de KCl, 1 mM de DTT, 1 mM d’EDTA, 0,2 mg/mL de BSA et 50% (v/v) de glycérol
Effets de la méthylation :
- Barrage : peut se chevaucher — sans effet
- Dcm : jamais de — chevauchement sans effet
- CpG : jamais de — chevauchement sans effet
- EcoKI : jamais de chevauchement — sans effet
- EcoBI : jamais de chevauchement — sans effet
Digestion de l’ADN incorporé dans l’agarose :
- Un minimum de 10 U de cette enzyme est nécessaire pour la digestion complète de 1 μg d’ADN lambda embêté dans l’agarose en 4 heures
Remarque :
Le clivage du FspBI est altéré par la méthylationdu barrage qui se chevauche. Pour éviter la méthylation parbarrage , utilisez une souchedcm à barrage comme GM2163 (#M0099).
Spécifications
Spécifications
| Concentration | 10 U/μL |
| Sensibilité à la méthylation | Pas sensible à la méthylation du barrage, Non sensible à la méthylation du DCM, Pas sensible à la méthylation du CpG |
| Enzyme | FspBI (BfaI) |
| Tampon compatible | Tango tampon 10X |
| Sensible à l’inactivation par la chaleur | Oui |
| Température de réaction optimale | 37 °C |
| ER de type IIS | Non |
| Quantité | 2 500 unités |
| Type de produit | Restriction Enzyme |
| Catégorie de recherche | Clonage traditionnel |
Usage exclusivement réservé à la recherche. Ne pas utiliser dans des procédures de diagnostic.