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Thermo Scientific™ Esp3I (BsmBI) (10 U/μL)
Description
ADN lambda digéré avec Esp3I (BsmBI), 1% d’agarose, 14 sites de clivage
Les endonucléases de restriction conventionnelles constituent un vaste ensemble d’enzymes de restriction de haute qualité, optimisées pour fonctionner dans l’un des tampons du système à cinq tampons. De plus, le tampon universel Tango est fourni pour faciliter la double digestion. Toutes les enzymes présentent une activité de 100% dans les conditions tampons et réactions recommandées. Pour assurer une performance constante, les Thermo Scientific tampons de réaction enzymatique de restriction contiennent des BSA prémélangés, ce qui améliore la stabilité de nombreuses enzymes et lie les contaminants présents dans les préparations d’ADN.
5'... C G T C T C (N)1▵... 3'
3'... G C A G A G (N)5▵... 5' Conditions pour une activité à 100% :
- [1X Tango tampon] + DTT : [33 mM Tris-acétate (pH 7,9 à 37 °C), 10 mM Mg-acétate, 66 mM K-acétate et 0,1 mg/mL BSA] + 1,0 mM DTT
- Incubez à 37 °C
Tampon de stockage :
- L’Esp3I est fourni en : 10 mM de phosphate de potassium (pH 7,4 à 25 °C), 100 mM de KCl, 1 mM d’EDTA, 1 mM de DTT, 0,5 mg/mL de BSA et 50% (v/v) de glycérol
Ligature et reclivage :
- Après une surdigestion multipliée par 50 avec Esp3I, plus de 95% des fragments d’ADN peuvent être ligés et recoupés
Effets de la méthylation :
- Dam : ne se chevauche jamais — aucun effet
- Dcm : jamais de chevauchement — aucun effet
- CpG : complètement bloqué par chevauchement
- EcoKI : ne jamais se chevaucher — aucun effet
- EcoBI : effet de chevauchement possible non déterminé
Digestion de l’ADN incorporé dans l’agarose :
- Un minimum de 5U de l’enzyme est requis pour la digestion complète de 1 μg d’ADN lambda embêté dans l’agarose en 16 heures
Remarque :
L’enzyme nécessite la DTT. La TNT fraîchement créée devrait être ajoutée au tampon de réaction. Esp3I découle en aval de son site de reconnaissance et peut générer n'importe quel dépassement de 4 bases de 5 pieds désiré. Cette fonctionnalité est utile pour le clonage de produits PCR.
Spécifications
Spécifications
| Concentration | 10 U/μL |
| Sensibilité à la méthylation | CpG sensible à la méthylation, Pas sensible à la méthylation du barrage, Non sensible à la méthylation du DCM |
| Enzyme | Esp3I (BsmBI) |
| Tampon compatible | Tango tampon 10X |
| Sensible à l’inactivation par la chaleur | Oui |
| Température de réaction optimale | 37 °C |
| ER de type IIS | Oui |
| Quantité | 1 000 unités |
| Type de produit | Restriction Enzyme |
| Catégorie de recherche | Clonage sans cicatrice |
Usage exclusivement réservé à la recherche. Ne pas utiliser dans des procédures de diagnostic.