MP Biomedicals™ FastCellular™ Trousse de détection de sénescence, SPiDER-GalΒ

La sénescence cellulaire est un phénomène par lequel les cellules normales cessent de se diviser et entrent dans un état d’arrêt de croissance irréversible. C’est l’un des aspects les plus fondamentaux du comportement cellulaire et on croit généralement qu’il est associé à des mécanismes de suppression tumorale et une cause sous-jacente du vieillissement. La -galactosidase associée Βà la sénescence (SA-Β-gal), surexprimée dans les cellules sénescentes, a été largement utilisée comme marqueur de la sénescence cellulaire. Bien que X-gal soit un réactif bien connu utilisé pour détecter SA-Β-gal, X-gal présente les inconvénients suivants : 1) besoin de cellules fixes en raison d’une faible perméabilité cellulaire, 2) faible capacité quantitative en raison de la difficulté à différencier visuellement les cellules colorées de celles non colorées 3) nécessité de longues périodes de coloration.

Pour surmonter les inconvénients inhérents à l’utilisation de X-gal, nous utilisons un nouveau réactif et une nouvelle méthode pour la détection de la sénescence cellulaire. SPiDER-GalΒ offre une sensibilité accrue à la détection du SA-Β-gal grâce à une perméabilité cellulaire accrue et à une rétention à l’intérieur des cellules. Comparé à la méthode X-gal, le FastCellular kit de détection de la sénescence peut être utilisé à la fois pour les cellules vivantes et fixes, car nous fournissons de la Bafilomycine A1 pour inhiber Βspécifiquement l’activité endogène de la -galactosidase dans les cellules vivantes et ainsi augmenter la spécificité de détection pour les cellules vivantes. Pour les cellules fixes, le SA-Β-gal est détectable à l’aide de SPiDER-GalΒ et du tampon Mcllvaine (pH 6,0, veuillez consulter le protocole pour les tests à cellules fixes). Puisque SPiDER-GalΒ émet une fluorescence forte et stable après la réaction avec SA-Β-gal, il peut être appliqué à l’analyse quantitative par cytométrie en flux. De plus, le temps de coloration n’est que de 30 minutes. Le kit comprend une plaque à 6 puits contenant 1 unité de SPiDER-GalΒ et 1 unité de Bafilomycine A1

Avantages de l’utilisation FastCellular d’un kit de détection de sénescence :

• Sensibilité plus élevée grâce à une nouvelle sonde de détection fluorogénique
• Applicable aux cellules vivantes et aux tissus fixes
• Capacité à quantifier SA-Β-gal dans un test de sénescence cellulaire
• Temps de coloration court (30 min)