Thermo Scientific™ Easy-Titer™ Kit d’essai IgG pour souris

Ces kits comprennent des microsphères sensibilisées aux anticorps pour mesurer la concentration spécifique d’anticorps de souris, de lapins et d’humains grâce à une technique de micro-agglutination simple et rapide utilisant des microplaques standard et un lecteur de plaques UV-Vis (spectrophotomètre). Chaque kit est spécifique à une espèce et à une classe particulière d’immunoglobulines et, contrairement aux tests sur les protéines totales, peut mesurer spécifiquement la concentration d’anticorps cibles dans des échantillons (par exemple, sérum, plasma, surnageant de culture) contenant d’autres protéines. Les kits sont extrêmement sensibles, nécessitant de très petits volumes d’échantillons. La concentration d’anticorps est déterminée à partir de la réponse au test (absorbance) par comparaison avec une courbe standard préparée à partir de dilutions d’un échantillon d’anticorps connu (vendu séparément).

Points clés :

• Les kits pour cinq cibles – populaires choisissent un kit spécifique à une espèce et une classe particulière d’immunoglobulines; pas de réaction croisée avec d’autres espèces et classes de l’anticorps cible

• La spécificité – basée sur les anticorps mesure la concentration de l’anticorps cible dans un échantillon, pas seulement la protéine totale; pas besoin de purifier l’anticorps pour évaluer sa concentration

• Plus rapide et plus facile que ELISA – le test homogène à trois composantes; Temps total d’incubation de 10 minutes

• Aucun équipement spécial n’utilise – un mélangeur de vortex standard, une pipette, une microplaque à 96 puits, un secoueur de plaques et un lecteur (mesurer l’absorption à 340 nm ou 400 nm)

• Plage de test sensible – (courbe standard) de 8 à 500 ng/mL; nécessite un échantillon de départ d’au moins 300 ng/mL

• Coefficient de variation reproductible – inférieur à 5%; l’erreur dépend de la dilution et de la technique de pipetage

• Les normes d’anticorps vendues séparément – utilisent tout standard d’anticorps ayant une identité cible appropriée et une concentration connue (supérieure à 10 μg/mL)

Easy-Titer Les tests d’anticorps sont plus rapides et plus faciles que l’ELISA :

1. Préparer des étalons (5 à 500 ng/mL) en diluant les anticorps purifiés dans un tampon de dilution en kit

2. Préparez les échantillons en diluant au moins 20 fois dans le tampon de dilution jusqu’à la plage du test (8 à 500 ng/mL).

3. Fiole vortex de billes de microsphère pour créer une suspension homogène.

4. Pipette de 20 μL de suspension à billes et 20 μL de chaque échantillon standard dans des puits de microplaques à 96 puits.

5. Incuber la microplaque pendant 5 minutes avec un mélange vigoureux.

6. Ajouter 100 μL de réactif bloquant le kit.

7. Incuber la microplaque pendant 5 minutes avec un mélange vigoureux.

8. Mesurer l’absorbance sur un lecteur de plaques standard (340 nm ou 405 nm).

9. Tracer la courbe standard et interpoler les échantillons pour déterminer la concentration.

Comprend :

Chaque kit contient des microsphères IgG sensibilisées spécifiques à la cible, un tampon de dilution et un tampon de blocage