Invitrogen™ Dynabeads™ M-280 Tosylactivé

Lorsque vous souhaitez coupler covalentement des anticorps, des peptides, des protéines intactes et des enzymes fonctionnelles à la surface d’une bille magnétique, choisissez Dynabeads Tosylactivated. Une orientation optimale des anticorps fait de ces billes un excellent choix pour l’immunoprécipitation des protéines et des complexes protéiques.

Idéal pour l’immunoprécipitation des complexes protéiques :
Un faible lien de fond et covalent des anticorps à la surface de la bille fait de Dynabeads Tosylactivated un excellent choix pour l’immunoprécipitation des protéines et des complexes protéiques (co-immunoprécipitation, co-IP). La concentration magnétique douce et rapide des billes ainsi que les temps d’incubation courts (possibles grâce à une cinétique de liaison rapide basée sur la surface) font Dynabeads de Tosylactivated un excellent choix pour l’immunoprécipitation de complexes protéiques hautement labiles ou/ou transitoires (à courte durée de vie).

Protocoles ultra rapides :
• Identifier les membres des complexes protéiques en quelques minutes plutôt qu’en heures
• Résolution temporelle assez courte pour identifier les•
complexes transitoires et labiles Identifier les partenaires de liaison qui ne peuvent pas être identifiés avec des protocoles
• plus longs Les protocoles rapides réduisent encore la liaison
• de fond déjà ultra-faible Rapports

signal/bruit plus forts Applications :
• IP des protéines et des complexes protéiques Coupler les enzymes fonctionnelles à la surface des billes pour les essais•
en aval Coupler les peptides à la surface des billes pour identifier les

liants Purifier les peptides, protéines et enzymes qui sont :
•
• Stable
• transitoirement Structurellement intact•
Température instable
• Dans leur conformation native et leur fonctionnement

Procédure de couplage Résumé :
Le couplage covalent est effectué toute la nuit en incubant le ligand désiré avec le Dynabeads Tosylactivé. Les ligands couramment couplés à Dynabeads Tosylactivated incluent des peptides et des protéines (par exemple, des anticorps pour l’immunoprécipitation ou la co-immunoprécipitation). Le couplage se produit à pH neutre à élevé et à 37 °C. Nous recommandons un couplage au pH 8,5 –à 9,5, mais pour les ligands sans pH, le couplage peut être effectué dans un tampon alternatif au pH 7,4.

À la fin de l’étape de couplage du ligand, le revêtement de surface Tosylactivated réel Dynabeads devient inerte, ce qui entraîne une faible liaison non spécifique.

À propos de Dynabeads :
Dynabeads sont des billes superparamagnétiques monodisperses non poreuses. Ils sont très mobiles en solution, permettant aux ligands couplés aux billes d’interagir continuellement avec l’ensemble du volume de l’échantillon. Les billes superparamagnétiques sont attirées vers les parois du tube en transférant le tube sur un rack contenant un champ magnétique puissant (À partir de la barre de navigation rouge, naviguez les aimants de marques > Dynal >). De puissants champs magnétiques attirent rapidement les billes vers la paroi du tube, permettant un retrait facile et complet du surnageant par la pipette. Les étapes de lavage sont effectuées de manière similaire.l

Caractéristiques de la surface des billes pour Dynabeads Tosylactivated :
• Groupes
• p-toluène-sulfonyle (Tosyl) Hydrophobes, pH neutre
• Liaison covalente par les groupes

amine primaire (NH₂) ou sulfydryl (SH) Capacité de liaison par billes de milligrammes :
Varie selon le ligand (par exemple 5 –à 10 μg d’IgG)