Invitrogen™ Dynabeads™ MyOne™ Épuisement leucocytaire au CD45

Dynabeads MyOne La déplétion leucocytaire CD45 est un produit hautement efficace conçu pour l’épuisement des cellules humaines CD45 positives à partir du sang entier, de la couche buffy ou des cellules mononucléaires du sang périphérique (PBMC). Après avoir éliminé les cellules liées aux billes, le produit permet d’utiliser les cellules cibles rares restantes intactes, telles que les cellules tumorales circulantes (CTC), dans des applications en aval. Les CTC intacts obtenus peuvent être pelletés et lysés directement à l’aide du TaqMan kit Cells-to-CT Express (Cat. No A57988).

Dynabeads MyOne La déplétion leucocytaire CD45 est composée de billes uniformes, superparamagnétiques, contenant un anticorps IgG2a monoclonal primaire de souris spécifique à toutes les isoformes connues de CD45, une glycoprotéine membranaire présente sur tous les leucocytes humains. Le produit peut être utilisé pour épuiser facilement et efficacement les cellules CD45 positives à partir d’échantillons visqueux comme le sang total en environ 30 minutes.

Les Dynabeads MyOne billes magnétiques de déplétion leucocytaire CD45 traitent environ 2,5 x 10⁸ PBMC par mL de billes.

Caractéristiques et avantages

• Déplétion efficace des leucocytes humains à partir du PBMC et du sang total
• Enrichissement des CTC viables et intacts par l’appauvrissement des leucocytes
• Forte efficacité de déplétion des granulocytes contaminants dans les échantillons de sang total
• Hautement automatisable pour l’enrichissement CTC avec les systèmes de purification KingFisher Apex

Aperçu du flux de travail pour CTC l’enrichissement

Pour l’enrichissement CTC , Dynabeads MyOne une déplétion leucocytaire CD45 est ajoutée à l’échantillon sous une inclinaison douce et une rotation pendant 30 minutes afin d’optimiser la liaison aux leucocytes. L’échantillon est ensuite placé sur un aimant pendant 5 minutes pour séparer les leucocytes liés aux billes des CTC enrichis. Le surnageant contenant les CTC enrichis est transféré dans un nouveau tube et les leucocytes liés aux billes sont éliminés. Lors de l’enrichissement des CTC directement à partir du sang total, il est recommandé aux globules rouges avant l’épuisement (par exemple, en utilisant Gibco le tampon de lyse ACK (Cat. Non. A1049201)). Dynabeads MyOne La déplétion leucocytaire CD45 est particulièrement efficace pour éliminer les granulocytes contaminants des échantillons de sang total.

Isolation négative à haut débit des CTC sur les systèmes de purification KingFisher

L’enrichissement des CTC en circulation est un processus long lorsqu’on travaille avec de nombreux échantillons en parallèle et peut entraîner une augmentation des erreurs de manipulation manuelle. En utilisant les systèmes de purification d’échantillons KingFisher, vous pouvez obtenir une récupération à haut débit des CTC intacts en environ 50 minutes après avoir chargé l’échantillon et les réactifs dans les plaques. Les CTC résultants sont viables et adaptés à la culture, à l’analyse moléculaire en aval ou à l’analyse protéomique.

Stratégies alternatives d’isolation positive pour les CTC

S’il est préférable d’isoler positivement les CTC pour des applications moléculaires en aval telles que la RT-qPCR, nous recommandons d’utiliser Dynabeads l’enrichissement épithélial (EpCAM). Pour isoler positivement les CTC sans billes pour des applications immunologiques telles que la culture cellulaire ou la cytométrie en flux, nous recommandons l’utilisation Dynabeads CELLection de l’enrichissement épithélial (EpCAM). Si vous utilisez votre propre anticorps biotinylé, nous recommandons d’utiliser Dynabeads MyOne la Streptavidine T1.

Approvisionnement commercial

Nos sites de fabrication sont ISO certifiés 13485, assurant une qualité et une reproductibilité constantes des produits. Dynabeads leurs caractéristiques et conditions de fabrication les rendent bien adaptés à l’approvisionnement commercial. Si vous souhaitez personnaliser Dynabeads MyOne la déplétion leucocytaire CD45 pour un produit commercial ou si vous souhaitez un volume en vrac plus important, veuillez nous contacter à oemdynal@lifetech.com ou visiter notre Dynabeads page OEM pour plus d’informations.