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Invitrogen™ Dynabeads™ Enrichissement épithélial

Numéro de catalogue. 16103D
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Numéro de catalogue. 16103D Fournisseur Invitrogen™ Code fournisseur 16103D

Pour de l'aide SVP utiliser la function de clavardage; nous envoyer un couriel à help@thermofisher.com ou appelez le service à la clientèle au 1-800-234-7437.

Dynabeads Epithelial Enrich contient des billes superparamagnétiques de μ 4,5 m couplées à un anticorps monoclonal de souris anti-humain EpCAM et est destiné à l’isolement des cellules tumorales épithéliales circulantes (CTC) à partir d’échantillons de biopsie liquide.

Dynabeads L’enrichissement épithélial consiste en des billes superparamagnétiques de μ 4,5 m couplées à un anticorps EpCAM monoclonal de souris anti-humain et sont destinées à l’isolement des cellules tumorales épithéliales circulantes (CTC) à partir d’échantillons de biopsie liquide. La méthode d’isolation sensible fournie par Dynabeads Epithelial Enrich est nécessaire compte tenu du faible nombre de CTC dans les échantillons de biopsie liquide. Les CTC isolés restent fixés aux billes tout au long du processus.

Pour une analyse moléculaire ou protéomique en aval, les cellules peuvent être lysées directement tout en restant attachées aux biles. La RT-PCR peut être réalisée pour l’amplification et la quantification des acides nucléiques cibles. CTC l’isolement et toute application protéomique ou moléculaire ultérieure à base de billes peut être effectué manuellement ou automatisé à l’aide du système de purification KingFisher Apex.

Les bienfaits de l’enrichissement Dynabeads épithélial incluent :

  • Haute sensibilité et isolation de spécificité des CTC à partir d’échantillons de biopsie liquide
  • Isolation rapide et efficace des CTC viables
  • Guide utilisateur et script d’automatisation disponibles pour un enrichissement à haut débit utilisant l’instrument KingFisher Apex

Isolement positif des cellules tumorales épithéliales circulantes à base de dynabeads

Dynabeads Les enrichissements épithéliaux sont ajoutés à l’échantillon sous mélange continu pendant 30 minutes afin d’optimiser la liaison des Dynabeads CTC aux CTC cibles. En plaçant l’échantillon dans un DynaMag aimant, les cellules épithéliales liées aux billes sont séparées du reste de l’échantillon en l 2 minutes. Le surnageant est jeté, et les cellules liées aux perles sont lavées 2 à 3 fois pour obtenir une pureté optimale. Les cellules peuvent être lysées tout en restant attachées aux billes et le surnageant transféré dans un nouveau tube pour la culture cellulaire ou une analyse moléculaire ou protéomique en aval. L’analyse de l’expression génique sans enrichissement préalable de l’ARN peut facilement être réalisée à l’aide du TaqMan kit Cells-to-CT Express. Les échantillons de départ peuvent être du sang entier, du pelage buffy, de la moelle osseuse ou des cellules mononucléaires du sang périphérique (PBMC).

Isolation positive à haut débit des CTC sur l’instrument KingFisher Apex

L’ensemble du flux de travail peut être automatisé à l’aide du système de purification KingFisher Apex avec des plaques de 96 puits profonds. La récupération à haut débit des CTC liés aux billes peut être réalisée en environ 50 minutes après le chargement de l’échantillon et des réactifs dans les plaques. Les CTC isolés sont viables et adaptés à la culture ainsi qu’à l’analyse moléculaire ou protéomique en aval. Les avantages de l’isolement automatisé CTC incluent :

  • Réduction du temps d’intervention manuelle
  • Haute reproductibilité grâce à moins d’erreurs de manipulation manuelle
  • Un débit accru avec une haute pureté de CTC viables.

Méthodes alternatives CTC d’enrichissement

Isolement positif avec libération : S’il est préférable d’isoler positivement les CTC pour des applications immunologiques telles que la cytométrie en flux, nous recommandons l’utilisation Dynabeads CELLection de l’enrichissement épithélial (Cat. No 16203) où les perles sont libérées des cellules après l’isolement. Les CTC sans billes sont pures, viables et peuvent être utilisées dans n’importe quelle application en aval. Si vous utilisez votre propre anticorps biotinylé, nous recommandons d’utiliser Dynabeads MyOne la Streptavidine T1.

Isolement négatif des CTC non modifiés : S’il est préférable d’isoler les CTC non modifiées par épuisement des leucocytes, nous recommandons d’utiliser Dynabeads CD45 (Cat. No 11153D).

Approvisionnement commercial

Nos sites de fabrication sont ISO certifiés 13485. Les caractéristiques des billes et les conditions de fabrication contribuent à assurer la cohérence et la reproductibilité des lots, ce qui les rend bien adaptés à la fourniture commerciale. Si vous êtes en train de personnaliser Dynabeads l’enrichissement épithélial dans un produit ou service commercial ou si vous avez besoin d’un volume en vrac plus important de ce produit, veuillez nous contacter à oemdynal@lifetech.com ou lire plus sur notre Dynabeads page OEM.

Spécifications

Type de cellules Cellules T
Contenu et stockage Ce produit contient : 2 mL Dynabeads™ recouverts de l’anticorps monoclonal BerEP4 contre l’antigène épithélial humain, EpCAM.
Conserver à 2 °C à 8 °C.
Couleur Brun
À utiliser avec (application) Épuisement cellulaire, Isolation positive pour applications moléculaires
Matériau Polystyrène magnétique
Type de produit Bille revêtue d’anticorps
Compatibilité à haut débit Oui
Nb de cellules Processus ∼8x 10^8 cellules au total
Viabilité des résultats >95%
Gamme de produit Dynabeads
Grade de qualité ou de pureté Niveau de recherche
Quantité 2 mL
Type d’échantillon Cellules tumorales, cellules épithéliales
Shipping condition (Condition d'expédition) Température ambiante
Nb de cellules du matériel de départ 1 x 10^7 PBMC par isolation
Espèces cibles Humain
Diamètre (métrique) 4,5 μm
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Usage exclusivement réservé à la recherche. Ne pas utiliser dans des procédures de diagnostic.