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Molecular Probes™ Click-iT™ Plus kit de synthèse protéique OPP Alexa Fluor™ 488
Description
Le Click-iT™ kit de synthèse des protéines Plus OPP Alexa Fluor™ 488 offre une méthode rapide, sensible et non radioactive pour la détection de la synthèse protéique à l’aide de la microscopie à fluorescence ou de l’imagerie à haute teneur. Dans cet essai, l’O-propargyl-puromycine (OPP) est efficacement incorporée dans les protéines nouvellement traduites dans un milieu complet contenant de la méthionine et marquée fluorescentement avec un colorant brillant et photostable Alexa Fluor™ lors d’une réaction rapide, très spécifique et légère.
Les caractéristiques du kit incluent :
Aucun changement de milieu ne nécessite—de fonctionner dans un média complet contenant de la méthionine, pas besoin d’enlever les milieux cellulaires
La technologie Click-iT™ Plus, compatible—multiplex, retient le signal de la GFP et de la liaison des phalloïdes conjugués fluorescents
Non radioactive—: une alternative aux méthodes traditionnelles à 35S-méthionine
Des travaux in vivo—publiés démontrent une utilisation in vivo pour la détermination de la traduction
des protéines. Le kit contient de l’O-propargyl-puromycine (OPP), qui est un analogue alkyne de la puromycine (également disponible séparément), ainsi que Alexa Fluor™ 488 picolyl azide et tous les réactifs nécessaires pour effectuer la réaction Click. L’OPP est transmis aux cellules cultivées et incorporé dans les protéines lors de la synthèse protéique active. L'ajout des Alexa Fluor™ réactifs 488 picolyl azide et de la réaction Click conduit à une ligation chimiosélective, ou réaction « clic », entre le colorant picolyl azide et l'alkyne OPP, permettant de détecter les protéines modifiées par analyse basée sur l'imagerie.
La réaction de clic utilise des moitiés bioorthogonales (biologiquement uniques) pour marquer les cellules proliférantes fluorescentement, aidant à produire de faibles fonds de fond et de fortes sensibilités à la détection. En raison des conditions de réaction douces, Click-iT™ les tests Plus détectent les événements de traduction des protéines tout en permettant la préservation de la morphologie cellulaire, la liaison de la phalloïdine marquée fluorescentement et le signal fluorescent de la GFP.
Contrairement à la 35S-méthionine, utilisée dans les méthodes traditionnelles, l’OPP n’est pas un analogue d’acides aminés, elle peut donc être ajoutée directement aux cellules dans un milieu complet ou utilisée pour déterminer la synthèse des protéines in vivo.
Le kit contient tous les composants nécessaires pour marquer et détecter l’OPP incorporé dans les protéines nouvellement traduites dans des échantillons de cellules adhérentes. Le kit comprend suffisamment de réactifs pour l’étiquetage de 25 caches de 18 mm × 18 mm utilisant 1 mL de tampon de réaction par test.
Les caractéristiques du kit incluent :
des protéines. Le kit contient de l’O-propargyl-puromycine (OPP), qui est un analogue alkyne de la puromycine (également disponible séparément), ainsi que Alexa Fluor™ 488 picolyl azide et tous les réactifs nécessaires pour effectuer la réaction Click. L’OPP est transmis aux cellules cultivées et incorporé dans les protéines lors de la synthèse protéique active. L'ajout des Alexa Fluor™ réactifs 488 picolyl azide et de la réaction Click conduit à une ligation chimiosélective, ou réaction « clic », entre le colorant picolyl azide et l'alkyne OPP, permettant de détecter les protéines modifiées par analyse basée sur l'imagerie.
La réaction de clic utilise des moitiés bioorthogonales (biologiquement uniques) pour marquer les cellules proliférantes fluorescentement, aidant à produire de faibles fonds de fond et de fortes sensibilités à la détection. En raison des conditions de réaction douces, Click-iT™ les tests Plus détectent les événements de traduction des protéines tout en permettant la préservation de la morphologie cellulaire, la liaison de la phalloïdine marquée fluorescentement et le signal fluorescent de la GFP.
Contrairement à la 35S-méthionine, utilisée dans les méthodes traditionnelles, l’OPP n’est pas un analogue d’acides aminés, elle peut donc être ajoutée directement aux cellules dans un milieu complet ou utilisée pour déterminer la synthèse des protéines in vivo.
Le kit contient tous les composants nécessaires pour marquer et détecter l’OPP incorporé dans les protéines nouvellement traduites dans des échantillons de cellules adhérentes. Le kit comprend suffisamment de réactifs pour l’étiquetage de 25 caches de 18 mm × 18 mm utilisant 1 mL de tampon de réaction par test.
Spécifications
Spécifications
| Type de produit | Trousse de synthèse protéique |
| Quantité | 1 kit |
| Contenu et stockage | Ce kit contient : Click-iT™ Réactif OPP, Alexa Fluor™ colorant picolyl azide, Click-iT™ tampon de réaction OPP, protecteur au cuivre, Click-iT™ additif tampon de réaction, Click-iT™ tampon de montée de réaction et NuclearMask™ teinture bleue. |
| Type de réactif | Réactif de marquage protéique naissant |
| Gamme de produit | Click-iT |
| Étiquette ou colorant | Alexa Fluor 488 |
Usage exclusivement réservé à la recherche. Ne pas utiliser dans des procédures de diagnostic.