Molecular Probes™ Click-iT™ Kit de synthèse des protéines HPG Alexa Fluor™ 594

Le Click-iT™ kit de synthèse des protéines HPG Alexa Fluor™ 594 offre une méthode rapide, sensible, non toxique et non radioactive pour la détection de la synthèse protéique naissante utilisant la microscopie à fluorescence, l’imagerie à haute teneur ou la cytométrie en flux. Le kit comprend la L-homopropargylglycine (HPG), un acide aminé analogue de la méthionine contenant une moitié alkyne, et Alexa Fluor™ 594 azide. Le HPG est transmis aux cellules cultivées et incorporé dans les protéines lors de la synthèse protéique active. L'ajout de l' Alexa Fluor™ azide 594 entraîne une ligation chimiosélective ou “une réaction de clic entre l'azide fluorescente verte et l'alkyne, permettant de détecter les protéines modifiées par analyse basée sur des images.

Alternative—non radioactive : une alternative à la traditionnelle ³⁵S-méthionine

Visualisez la dynamique—des protéines en vrac : le marquage fluorescent des protéines permet de déterminer leur localisation, y compris l’agrégation

Réaction spécifique sélective—à la spécificité entre l’étiquette et les étiquettes de détection

Le produit de stabilité —contient une liaison irréversible et covalente

Utilisation en multiplex—en combinaison avec Click-iT™ AHA (acide aminé azide et colorant alkyne) pour détecter des différences spatiales et temporelles

Applicabilité aux échantillons—biologiques : facile détection; sensibilité élevée et faible fond, peu importe la complexité

Le Click-iT™ kit de synthèse protéique HPG Alexa Fluor™ 594 a été testé avec succès dans les cellules HeLa, A549 et U-2 OS avec une variété de réactifs inhibant la synthèse des protéines, dont la cycloheximide et l’anisomycine. L’applicabilité de ces sondes à la surveillance de la dégradation des protéines a également été démontrée à l’aide d’inhibiteurs du protéasome (MG132 et Bortézomib) et de bloqueurs de l’autophagie (chloroquine) dans les cellules HeLa.

De plus, en raison des différences chimiques Click-iT™ entre le Click-iT™ kit de synthèse des protéines HPG Alexa Fluor™ 594 et Click-iT™ le kit HCS AHA Alexa Fluor™ 488, ces kits peuvent être utilisés conjointement pour la détermination spatiale ou temporelle des différences dans la synthèse protéique naissante.