Invitrogen™ CellTrace™ Trousse de prolifération cellulaire CFSE, pour la cytométrie en flux

CellTrace™ Le kit de prolifération cellulaire CFSE est utilisé pour le marquage in vitro et in vivo des cellules afin de tracer plusieurs générations grâce à la dilution de colorants par cytométrie en flux.

• Performance supérieure—La coloration brillante à un seul pic permet de visualiser plusieurs générations Stabilité—
• du signal à long terme bien conservée dans les cellules pendant plusieurs jours après la coloration
• La coloration non toxique—n’affecte pas négativement la santé•
cellulaire Protocole

de coloration simple etrobuste Coloration
fluorescente supérieureUne analyse réussie de la prolifération par dilution de colorants (voir figure ci-dessous) nécessite un colorant extrêmement brillant pour distinguer les cellules marquées fluorescentement de l’autofluorescence après plusieurs divisions cellulaires. La coloration fluorescente intense fournie par CellTrace™ le colorant CFSE permet de visualiser huit générations ou plus de cellules en prolifération avant que le signal ne soit submergé par l’autofluorescence cellulaire intrinsèque. Une coloration constante et homogène entraîne très peu de variation de fluorescence entre les cellules d’une population, ce qui permet d’observer des générations distinctes sans nécessiter de logiciels de modélisation complexes.

Rétention
du signal à long termeContrairement aux colorations qui marquent la membrane lipidique des cellules, CellTrace™ le colorant CFSE traverse facilement la membrane plasmique et se lie covalentemente à l’intérieur des cellules où le colorant fluorescent stable et bien conservé est conçu pour fournir un signal cohérent, même après plusieurs jours en culture cellulaire.

Non toxique
CellTrace™ Le colorant CFSE se lie covalemment à toutes les amines libres à la surface et à l’intérieur des cellules et montre peu de cytotoxicité, avec un effet minimal observé sur la capacité proliférative ou la biologie des cellules. Des chercheurs ont utilisé le marquage CFSE SE pour montrer que les cellules hématopoïétiques transplantables prolifèrent in vitro en réponse à la stimulation par un cocktail de facteurs de croissance.

Protocole
de coloration simple et robusteLe CellTrace™ kit de prolifération cellulaire CFSE contient des fioles à usage unique de colorant sec pratiques pour permettre des expériences à petite échelle sans préparer des quantités excessives de colorant. Une solution de stock est préparée en dissolvant le contenu d’un flacon dans du DMSO anhydre avant utilisation. Pour colorer 1 mL de cellules dans un milieu sans protéines, on utilise généralement 1 μL de cette solution stock. Les cellules doivent être colorées pendant 20 minutes à température ambiante avec une légère agitation. Un lavage rapide avec un substrat complet tremper ensuite la teinture restante en solution.

Consultez le manuel d’utilisateur pour les instructions de solubilité.