Invitrogen™ Dynabeads™ Trousse de purification d’ARNm (pour la purification d’ARNm à partir de préparations totales d’ARN).

Avantages de l’utilisation du Dynabeads™ kit de purification à ARNm :

• Obtenir de l’ARNm pur en généralement 15 minutes
• Récupérer et enrichir efficacement le transcriptome
• Préparez un ARNm adapté à presque toutes les applications en aval

Isolation pure et rapide de l’ARNm

Le Dynabeads™ kit de purification d’ARNm contient des billes magnétiques pour l’isolement du transcriptome d’ARNm de toute préparation totale d’ARN eucaryote (voir figure). Dynabeads™ Les billes magnétiques sont uniformes en taille et très mobiles en solution (voir figure). Cela permet à la surface de capture de billes d’interagir rapidement et continuellement avec l’ensemble de l’échantillon total d’ARN pendant la phase de capture de l’ARNm. L’ARN ribosomique et les petites molécules d’ARN (ARN de transfert, microARN, petit ARN nucléolaire et petit ARN cytoplasmique) ne se lient pas aux billes et sont rejetés. Seules les espèces d’ARN polyadénylées (ARNm) sont capturées, ce qui donne des résultats plus propres et plus sensibles (voir figure). En environ 15 minutes, l’ARNm pur est isolé et prêt à être utilisé dans des applications en aval.

Un processus d’enrichissement simple

Le Dynabeads™ kit de purification d’ARNm utilise un principe robuste de purification par affinité pour l’enrichissement de l’ARNm polyadénylé. Les superparamagnétiques Dynabeads™, couplés à l’oligo-(dT)₂₅, sont d’abord équilibrés avec le tampon de liaison, puis mélangés avec l’ARN total purifié. Les billes sont ensuite lavées pour éliminer les espèces d’ARN contaminantes, puis l’ARNm est élué en aussi peu que 5 μL de Tris-HCl de 10 mM. L’ensemble du processus est facilité par l’utilisation d’un aimant en néodyme (acheté séparément), qui permet l’immobilisation rapide et efficace des billes magnétiques lors des changements de tampon. L’ARN convient à toutes les applications moléculaires en aval, y compris :

• Clonage génétique
• Synthèse d’ADNc, construction de bibliothèque d’ADN
• RT-PCR, quantitative RT-PCR
• RPA (test de protection contre les ribonucléases)
• Hybridation soustractive
• Hybridation point/fente
• Extension d’amorce