Invitrogen™ Cells-to-CT™ 1-Step TaqMan™ Équipement

Comme d’autres membres de la Cells-to-CT™ famille de produits, le Cells-to-CT™ 1-Step TaqMan™ Kit permet d’effectuer une analyse d’expression directement à partir de cellules cultivées sans purification à l’ARN.

Cette nouvelle addition à la famille inclut un TaqMan™ 1-Step mixage maître RT-PCR. Le format à tube unique de l'étape RT-PCR simplifie plus que jamais le flux de travail « échantillon à réponse ». La combinaison de la technologie simple Cells-to- CT™ avec la capacité de cycle rapide du mélange maître RT-PCR en 1 étape permet un temps d’obtention plus rapide avec une manipulation limitée des échantillons.

Le Cells-to-CT™ 1-Step TaqMan™ kit est :

• Un flux de travail complet—optimisé inclut des réactifs de lyse cellulaire avec élimination de l’ADNg et TaqMan™ 1-Step un mélange maître RT-PCR
• Une préparation d’échantillon de 7 minutes plus rapide que jamais—, incluant le traitement DNase, combinée à une étape RT-PCR en temps réel de 28 minutes, permet un ∼flux de travail échantillon à réponse de 35 minutes
• Simple—10 étapes au total (préparation d’échantillons et RT-PCR en temps réel combinés)
• Robust—effectue une analyse d’expression génique sur 10 –100 000 cellules par échantillon; résultats équivalents à ceux provenant d’ARN purifié
• Convenient—contient suffisamment de réactifs pour effectuer 5 RT-PCR en temps réel pour chaque échantillon de cellule que vous préparez; cela vous permet d’étudier plusieurs cibles ou d’effectuer des RT-PCR réplicatives

Note : TaqMan™ les ensembles d’amorce/sonde sont vendus séparément.

Préparation simple de l’échantillon de 7 minutes, puis prêt pour la RT-PCR en temps réel

Que vous utilisiez des assiettes ou des tubes, le Cells-to-CT™ 1-Step TaqMan™ kit utilise une procédure simple de préparation de l’échantillon de 7 minutes. La technologie de lyse est conçue pour 10 –100 000 cellules cultivées par échantillon. Les cellules sont lavées dans du PBS et lysées en solution pendant 5 minutes à température ambiante avec un traitement simultané à la DNase. La lyse est terminée à température ambiante par une incubation de 2 minutes avec solution d’arrêt. Le lysat est maintenant prêt à être analysé sur votre instrument PCR en temps réel. Il suffit de l’ajouter à un mix master RT-PCR en temps réel contenant les TaqMan™ ensembles amorce/sonde d’intérêt. Sinon, le lysat peut être stocké à –20 °C. Comme les échantillons peuvent être traités directement dans des puits de culture (96 ou 384 puits), la manipulation des échantillons et le risque de perte ou d’erreur de transfert sont minimisés, facilitant un traitement rapide et à haut débit. Contrairement aux protocoles d’isolation à ARN en plusieurs étapes à l’ancienne, aucune étape de chauffage, de lavage ou de centrifugation n’est requise. Le kit simplifie grandement un processus laborieux de 30 –à 60 minutes et le réduit à 7 minutes.

Une solution complète et validée

Tous les composants du Cells-to-CT™ 1-Step TaqMan™ kit ont été optimisés pour des performances constantes et fiables. Cela élimine les incertitudes liées à l’assemblage séparé de la préparation d’échantillons et des mixages maîtres RT-PCR en temps réel en une étape. Pour une assurance qualité supplémentaire, le Cells-to-CT™ 1-Step TaqMan™ kit a été validé par TaqMan™ des tests d’expression génique et présente des performances équivalentes à celles obtenues avec l’ARN purifié.

Produit d’accessoires

Le TaqMan™ Cells-to-CT™ kit de contrôle (Cat. No. 4386995) a été conçu pour être utilisé avec TaqMan™ Cells-to-CT™ des produits. Ce kit contient un contrôle endogène (ACTB) pour normaliser la variabilité de la charge d’échantillon ainsi qu’un test d’expression génique artificiel XenoRNA™ et correspondant TaqMan™ pour surveiller les effets de l’inhibition par PCR.