Invitrogen™ Zero Blunt™ TOPO™ Kit de clonage PCR, sans cellules compétentes

Inclut le Zero Blunt TOPO vecteur contenant le gène ccdB pour la sélection positive, ne permettant que la croissance de vecteurs plasmidiques avec des recombinants. Résistants à la kanamycine (KanR) et Zeocin™ (ZeoR).
Vecteur pCRBlunt II-TOPO : conçu pour la relecture des
polymérases Le vecteur pCRBlunt II-TOPO est conçu pour cloner les produits PCR à extrémité émoussée générés par des polymérases de relecture thermostable telles que Platinum™ la Pfx DNA Polymerase. Le vecteur pCRBlunt II-TOPO contient :

• Les sites EcoRI flanquent le site d’insertion du produit PCR pour faciliter l’excision des inserts
• Kanamycine et Zeocin gènes de résistance pour votre choix de sélection chez E. coli
• Site promoteur/amorce SP6 pour la transcription et le séquençage d’ARN in vitro
• Emplacements d’amorce avant et arrière M13 pour le séquençage ou le dépistage PCR

pCRBlunt II-TOPO sélection
des clones pCRBlunt II-TOPO permet la sélection directe des recombinants via la perturbation du gène létal E. coli , ccdB. Le vecteur contient le gène ccdB fusionné à l’extrémité C du fragment LacZα . La ligature d’un produit PCR à extrémité émoussée perturbe l’expression de la fusion du gène LacZ-ccdα B, permettant la croissance uniquement de recombinants positifs lors de la transformation. Les cellules contenant un vecteur non recombinant sont tuées lors du placage. Par conséquent, le criblage bleu/blanc n’est pas requis.
Clonage
simplifié basé sur TOPOGrâce à TOPO la technologie de clonage, il n’est pas nécessaire d’utiliser des amorces PCR contenant des séquences spécifiques, post-PCR des procédures, la préparation des vecteurs ou d’autres étapes longues de manipulation de l’ADN. Il suffit d’ajouter votre réaction PCR directement au vecteur chargé par la topoïsomérase fourni, d’incuber 5 minutes, puis de transformer les cellules compétentes pour E. coli .
Clonage
efficaceAvec jusqu’à 95% des clones portant l’insert désiré, vous pouvez filtrer moins de clones, économisant du temps et de l’argent. Le vecteur pCRBlunt II-TOPO utilisé dans ce kit est équipé d’un gène ccdB létal pour une sélection efficace des produits recombinants PCR à extrémités émoussées générés par des polymérases de relecture thermostable.
La norme en clonage
En matière de clonage, TOPO™ la technologie du clonage est un partenaire fiable pour des milliers de scientifiques depuis plus de dix ans. Le clonage rapide, simple à utiliser et efficace TOPO™ a été appliqué à de nombreux vecteurs différents pour un large éventail d’applications.
Zero Blunt TOPO Options
du kit de clonage PCR Le Zero Blunt TOPO kit de clonage PCR pour l’insertion directe de produits PCR à extrémité émoussée dans un vecteur plasmidique peut être acheté avec une variété de cellules compétentes offrant différents avantages selon vos besoins
Clonage général : TOP10 cellules (Cat. No K2800-20, K2800-40)
Clonage haute efficacité : TOP10 Electrocomp™ Cellules (Cat. No K2860-01, K2860-40)
Clonage général, résistance au bactériophage T1 : DH5-T1Rα (Catégories n° K2820-20, K2820-40)
Croissance rapide : Mach1-T1R™ Chimiquement compétent E. coli (Cat. Non. K2830-20)
Fournissez le vôtre : pour la flexibilité et pour économiser de l’argent (Cat. N° 450254)
Une version du kit qui inclut un PureLink™ kit Quick Plasmid Miniprep (Cat. Non. K2800-02) pour une utilisation en isolation de plasmides recombinants propres et prêts pour le séquençage sont également disponibles.

• Rapide et facile : passez de la PCR aux clones en seulement trois étapes et en seulement 5 minutes de pratique
• Efficace : obtenir jusqu’à 95% de clones avec le bon insert
• Prouvé : performance fiable depuis plus de dix ans avec plus de 4 000 citations
• Simple : aucune ligase, post-PCR procédure ou amorce PCR contenant des séquences spécifiques n’est requise
• Vecteur : pCR™ Vecteur contondant II-TOPO : contient le gène ccdB, permettant la sélection directe des recombinants
• Méthode de clonage : TOPO clonage : Ligature de 5 minutes à base de topoisomerase –I de produits PCR émoussés amplifiés avec la relecture des polymérases thermostables
• Cellules compétentes : Diverses options : choisissez parmi des kits contenant soit des cellules compétentes générales, à haute efficacité, résistantes au bactériophage T1 et à croissance rapide (disponibles séparément) ou utilisez les vôtres
• Résistance aux antibiotiques : ampicilline (AmpR), kanamycine (KanR)

Clonage, clonage PCR