Thermo Scientific™ Kits de digestion tryptique

La préparation de l’échantillon est l’une des étapes les plus variables et les plus longues dans l’analyse des protéines par la SEP, et la qualité ainsi que la reproductibilité de l’extraction et de la préparation de l’échantillon influencent grandement les résultats. Parfois, des étapes supplémentaires sont nécessaires pour améliorer la qualité de l’échantillon, notamment la digestion et la récupération de fragments peptidiques à partir de gels SDS-PAGE, ou la guanidination peptidique pour améliorer la couverture des séquences. Chaque kit a été optimisé pour produire des digestions peptidiques de haute qualité pour une analyse protéomique fiable à l’aide de la spectrométrie de masse.

Kit
de digestion tryptique et de guanidination Pierce en solution Le kit de digestion tryptique et de guanidination Pierce en solution offre une procédure optimisée et des réactifs pour environ 90 digestions, chacune contenant entre 0,025 et 10 μg de protéines.

• La trypsine à digestion—complète digère complètement des protéines allant de 0,025 à 10 μg (∼90 réactions).
• Une réaction de guanidination spécifique—produit peu ou pas de modification •
N-terminale. Un kit pratique—comprend des réactifs pour la digestion, la réduction, l’alkylation et la guanidination
•. Une protéine efficace—peut être digérée et guanidinée en une seule journée

. La trypsine fende spécifiquement les liaisons peptidiques du côté carboxyle des résidus d’arginine et de lysine. Les signaux des peptides contenant de l’arginine sont généralement plus forts, en raison de la chaîne latérale plus basique. Pour améliorer l'ionisation globale, la guanidination convertit les lysines en homoarginines et est spécifique à l'amine de la lysine, mais peut se produire minimement à l'amine du N-terminal du peptide. Cette dérivatisation entraîne une augmentation de l’intensité des peptides contenant de la lysine et une meilleure couverture des séquences dans l’ensemble.

Kit
de digestion tryptique Pierce In-Gel Le kit de digestion tryptique Pierce In-Gel fournit un ensemble complet de réactifs pour effectuer environ 150 digestions sur des bandes protéiques colloïdales colorées par Coomassie ou fluorescentes. Le kit comprend de la trypsine porcine modifiée, des tampons décolorants, des réactifs de réduction, des réactifs d’alkylation et des tampons de digestion, ainsi que des instructions détaillées et simples.

• Complet—comprend tous les réactifs nécessaires pour la décoloration des gels, la réduction, l’alkylation et la digestion tryptique des protéines•
. Des procédures robustes—optimisées et des réactifs produisent des digestions fiables et une génération de données en utilisant une large gamme de conditions
• . Spécifique—contient de la trypsine de qualité SEP hautement purifiée et modifiée, sans activité chymotryptique et avec une activité

autolytique minimale Deux étapes clés de préparation de l’échantillon sont la digestion complète des protéines en peptides, puis la concentration et le nettoyage subséquents des peptides pour l’analyse par spectrométrie de masse. Le kit de digestion tryptique Pierce In-Gel réalise la première de ces étapes pour les échantillons de protéines extraits de tranches de gel. Les colonnes et pointes Spin Pierce C-18 réalisent la deuxième étape pour nettoyer l’échantillon afin qu’il soit prêt pour le MS.