Thermo Scientific™ Pierce™ Kit de tirage vers le bas pour l’interaction protéique biotinylée

Le kit permet d’effectuer un test par pull-down efficace avec une forte récupération et reproductibilité des protéines. Ce protocole utilise la streptavidine immobilisée pour capturer une protéine biotinylée et un format de colonne de spin qui permet une rétention complète du gel à chaque étape de capture, lavage et élution. Lorsque la protéine d’appât biotinylée est immobilisée, elle peut résister à des lavages stricts et reste liée lors de l’élution des protéines de proie, ce qui donne une protéine isolée sans contamination par les protéines d’appât. Cette technique est idéale lorsqu’on utilise des protéines natives ou recombinantes qui ne sont pas exprimées avec une étiquette de fusion. De plus, la protéine de proie est isolée à partir de la protéine d’appât immobilisée en utilisant des conditions de liaison natives et des conditions d’élution non dénaturantes. Le kit d’interaction protéique biotinylée est conçu pour enseigner la méthode aux utilisateurs débutants et pour augmenter la facilité d’utilisation et la commodité des chercheurs expérimentés.

Points clés :

• Le tirage vers le bas – de la biotine purifie les interacteurs protéiques de toute protéine biotinylée ou ligand marqué à la biotine

• Le kit – complet fournit tous les composants et le protocole détaillé pour purifier les interactions protéine :protéine

• Aucun équipement spécial nécessaire – n’utilise l’équipement de laboratoire courant et les réactifs (par exemple, une microcentrifugeuse)

• Efficacité – des colonnes de spin des microcentrifugeuses facilitent la manipulation simple et efficace des billes d’agarose de streptavidina, y compris un traitement simple de plusieurs échantillons

Comprend :

Résine d’agarose de streptavidine, TBS emballage, tampon bloquant la biotine, tampon de lavage, tampon d’élution, colonnes de spin et tubes de collecte

Recommandé dans les domaines suivants :

Découvrir un nouveau complexe d’interactions protéiques utilisant une protéine biotinylée comme appât pour capturer un partenaire de liaison présumé à partir d’un lysat cellulaire ou d’un autre échantillon; Confirmer l’expression d’une cible d’interaction protéique connue dans un lysat cellulaire; Déterminer la capacité de deux protéines purifiées à interagir (se lier) dans différentes conditions tampons; Extraire l’information d’interaction protéine :protéine à partir de lysats de transcription/traduction in vitro