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Thermo Scientific™ Maxima™ H Minus Synthèse ADNcDNA Master Mix
Description
Thermo Scientific Maxima H Minus cDNA Synthesis Master Mix, disponible avec ou sans dsDNase, fournit tous les composants de la réaction de synthèse de cDNA dans un mélange maître à tube unique pratique. Il est optimisé pour une synthèse d’ADNc très efficace pour des applications quantitatives RT-PCR (RT-qPCR) en deux étapes, ainsi qu’une synthèse reproductible d’ADNcC à des températures élevées (50-65 – °C) en moins de 30 minutes.
Le mix maître contient Maxima l’H Minus Reverse Transcriptase (RT) et RiboLock l’inhibiteur de RNase. Maxima H Minus RT est une enzyme avancée dérivée de M-MuLV RT par évolution in vitro. L’enzyme présente une haute thermostabilité, robustesse, processivité, taux de synthèse d’ADNc accru et absence d’activité RNase H. L’inhibiteur de la RNase recombinante RiboLock protège efficacement le gabarit d’ARN contre la dégradation par les RNases A, B et C à des températures allant jusqu’à 55 °C. Le mélange maître contient aussi un tampon de réaction, des dNTP, un oligo (dT)18 et des amorces hexamères aléatoires. Un tube séparé de mélange de contrôle No-RT est également fourni pour un contrôle RT négatif convientif.
Les deux kits sont capables d’une synthèse reproductible d’ADNc à des températures élevées (50°°–C 65 °C). La réaction de synthèse se termine généralement en 15 –à 30 minutes. La DNase spécifique double brin incluse dans le mélange maître de synthèse Maxima H Minus cDNA avec dsDNase permet de retirer l’ADN génomique des échantillons d’ARN en deux minutes sans affecter la qualité ou la quantité d’ARN. Cette dsDNase est aussi disponible séparément (Cat. Non. EN0771).
Les caractéristiques du Maxima H Minus cDNA Synthesis Master Mix incluent :
• Le mélange maître à un tube aide à réduire les étapes de pipetage et à améliorer la consistance des résultats
• RT-qPCR Efficacité RT accrue sur une large gamme de quantités d’ARN d’entrée et de cibles•
géniques Haute thermostabilité pour permettre des réactions RT dans une plage•
de température 50 –à 65 °C Étape intégrée du retrait génomique de l’ADN à partir d’échantillons d’ARN (Maxima H moins cDNA Mélange maître avec dsDNase seulement)
Informations supplémentaires sur les composants
• de la réaction Le mélange de contrôle No RT contient tous les composants du Maxima H Minus Synthesis Synthesis Master Mix sauf RT. La présence d’un produit PCR dans la réaction de contrôle No RT indique que la réaction est contaminée par de l’ADN. Pour améliorer encore l’efficacité de l’élimination de l’ADN génomique, l’incubation d’ARN modèle avec dsDNase (Cat. Non. EN0771) est fortement recommandé.
• De l’eau sans nucléase est fournie pour la mise en place de la réaction et la dilution de l’ADN de l’échantillon. L’absence d’exodéoxyribonucléases, de ribonucléases et de phosphatases a été confirmée par des tests de qualité appropriés.
• Pour améliorer davantage l’efficacité de l’élimination de l’ADN génomique, l’incubation d’ARN modèle avec la dsDNase incluse est fortement recommandée. (Maxima H moins cDNA Synthèse Master Mix avec dsDNase seulement)
• La dsDNase est utilisée pour l’élimination rapide et sécuritaire de l’ADN génomique contaminant provenant d’échantillons d’ARN. La dsDNase est facilement inactivée par un traitement thermique modéré (55 °C). Cela permet un flux de travail considérablement simplifié qui combine l’élimination de l’ADN génomique et la synthèse de l’ADNc en une seule procédure. (Maxima H moins cDNA Synthèse Master Mix avec dsDNase seulement)
Spécifications
Spécifications
| Concentration | 5X |
| Contenu et stockage | • Maxima H Moins Synthèse d'ADNcMix Maître (200 μL) |
| Format | Mélange maître |
| Performance de la PCR pour les régions riches en GC | Élevée |
| Vitesse de réaction | 30 minutes |
| Technique | Transcription inverse |
| Température de réaction optimale | 50 °C |
| Quantité | À l’unité |
| Transcriptase inverse | Maxima H Minus |
| Activité ribonucléase H | Réduit |
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Usage exclusivement réservé à la recherche. Ne pas utiliser dans des procédures de diagnostic.