Invitrogen™ Zero Blunt™ TOPO™ Kit de clonage PCR pour séquençage, sans cellules compétentes

Utilise le pCR™4Blunt-TOPO™ vecteur avec des sites d’amorce de séquençage spécialement conçus qui retournent plus de séquence d’insertion et moins de séquence vectorielle à chaque réaction. Incluez les outils nécessaires pour cloner et sélectionner des vecteurs recombinants contenant votre fragment PCR de votre choix. Résistant à l’ampicilline (AmpR) et à la kanamycine (KanR).
Vecteur pCR4Blunt-TOPO : Optimisé pour le séquençage
Le vecteur pCR4Blunt-TOPO a un site de clonage multiple minimisé et, par conséquent, une distance plus courte entre les sites d’amorce de séquençage et le site d’insertion (aussi peu que 33 pb). Ainsi, les réactions de séquençage produisent moins de séquence vectorielle et plus de séquence d’insertion. Le vecteur pCR4Blunt TOPO possède des sites pour quatre amorces de séquençage courantes : M13 en avant, M13 en arrière, T7 et T3. Les kits incluent une aliquote de chaque.
Sélection et manipulation
des clones pCR4Blunt-TOPOLe vecteur pCR4Blunt-TOPO contient à la fois des marqueurs de résistance à l’ampicilline et à la kanamycine ainsi qu’une fusion du gène LacZ-ccdα B pour la sélection positive et le criblage bleu/blanc. Le site de clonage multiple minimisé du vecteur inclut toujours des sites EcoRI adjacents pour une excision simplifiée des produits PCR clonés et un site unique Sse8387I pour la génération de suppressions imbriquées avant le séquençage. T7 et T3 des promoteurs sont également présents pour la transcription in vitro.
Clonage
simplifié basé sur TOPOGrâce à TOPO la technologie de clonage, il n’est pas nécessaire d’utiliser des amorces PCR contenant des séquences spécifiques, post-PCR des procédures, la préparation des vecteurs ou d’autres étapes longues de manipulation de l’ADN. Il suffit d’ajouter votre réaction PCR directement au vecteur chargé par la topoïsomérase fourni, d’incuber 5 minutes, puis de transformer les cellules compétentes pour E. coli .
Clonage
efficaceAvec jusqu’à 95% des clones portant l’insert désiré, vous pouvez filtrer moins de clones, ce qui fait gagner du temps et de l’argent. Le vecteur pCR4Blunt-TOPO n’a pas de surplombs pour une ligation efficace des produits PCR créés en relisant des polymérases thermostables qui laissent des produits PCR émoussés.
Le kit
de clonage le plus utiliséEn matière de clonage, TOPO la technologie du clonage est un partenaire fiable pour des milliers de scientifiques depuis plus de dix ans. Le clonage rapide, simple à utiliser et efficace TOPO a été appliqué à de nombreux vecteurs différents pour un large éventail d’applications.
Options d’équipement : Zero Blunt TOPO Kits de clonage PCR pour le séquençage
Zero Blunt TOPO Les kits de clonage PCR pour le séquençage peuvent être achetés avec une variété de cellules compétentes qui offrent différents avantages selon vos besoins :

• Clonage général : TOP10 cellules (Cat. No. K2875-J10, K2875-20, K2875-40)
• Clonage à haute efficacité : TOP10 Electrocomp™ cellules (Cat. No. K2880-20, K2880-40)
• Clonage général, résistance au bactériophage T1 : DH5-T1Rα (Cat. Non. K2895-20)
• Croissance rapide : Mach1-T1R™ chimiquement compétent E. coli (Cat. Non. K2835-20)
• Fournissez vos propres cellules (cat. n° 450159 et 450031)

• Rapide et facile : passez de la PCR aux clones en seulement trois étapes, incluant une réaction de clonage de 5 minutes
• Efficace : obtenir jusqu’à 95% de clones avec le bon insert
• Prouvé : permettant une performance fiable depuis plus d’une décennie avec plus de 20 000 citations
• Simple : aucune ligase, post-PCR procédure ou amorce PCR contenant des séquences spécifiques n’est nécessaire
• Précis : pour une utilisation avec des ADN polymérases haute fidélité, pas besoin de surplomb en A sur le produit PCR
• Résistance aux antibiotiques : ampicilline (AmpR), kanamycine (KanR)

Clonage, clonage PCR