Invitrogen™ Zero Blunt™ TOPO™ Kit de clonage PCR pour le séquençage, avec un Shot™ Mach1™ E. coli chimiquement résistant aux phages T1

Ces kits incluent tout ce qu’il faut pour cloner et sélectionner des vecteurs recombinants contenant votre fragment PCR de choix. Chaque kit utilise le pCR™4Blunt-TOPO vecteur avec des sites d’amorce de séquençage spécialement conçus qui retournent plus de séquence d’insertion et moins de séquence vectorielle à partir de chaque réaction.
Vecteur pCR4Blunt-TOPO : Optimisé pour le séquençage
Nous avons retiré une grande partie du site de clonage multiple du vecteur pCR4Blunt-TOPO afin de raccourcir la distance entre les sites d’amorce de séquençage et le site d’insertion à aussi peu que 33 pb. Cela signifie que les réactions de séquençage donnent moins de séquence vectorielle et plus de séquence d’insertion. Le vecteur pCR4Blunt TOPO possède des sites pour quatre amorces de séquençage courantes : M13 en avant, M13 en arrière, T7 et T3. Les kits incluent une aliquote de chaque.
Sélection et manipulation
des clones pCR4Blunt-TOPOLe pCR4Blunt-TOPO; Le vector contient à la fois des marqueurs de résistance à l’ampicilline et à la kanamycine ainsi qu’une fusion du gène LacZ-ccdBα pour la sélection positive et le criblage bleu/blanc. Le site de clonage multiple minimisé du vecteur inclut toujours des sites EcoRI adjacents pour une excision simplifiée des produits PCR clonés et un site unique Sse8387I pour la génération de suppressions imbriquées avant le séquençage. T7 et T3 des promoteurs sont également présents pour la transcription in vitro.
Clonage
simplifié basé sur TOPOAvec la TOPO technologie de clonage, il n’est pas nécessaire d’utiliser des amorces PCR contenant des séquences spécifiques, post-PCR des procédures, la préparation du vecteur ou d’autres étapes de manipulation de l’ADN qui prennent beaucoup de temps. Il suffit d’ajouter votre réaction PCR directement au vecteur chargé par la topoïsomérase fourni, d’incuber 5 minutes, puis de transformer les cellules compétentes fournies par E. coli.
Clonage
efficaceAvec jusqu’à 95% des clones qui portent l’insert désiré, vous pouvez filtrer moins de clones pour économiser du temps et de l’argent. Le vecteur pCR4Blunt-TOPO utilisé dans ce kit ne comporte pas de surplombs pour une ligation efficace des produits PCR créés par la relecture, des polymérases thermostables qui laissent des produits PCR à extrémité émoussée.
La norme en clonage
En matière de clonage, TOPO la technologie du clonage est un partenaire fiable pour des milliers de scientifiques depuis plus de dix ans. Le clonage rapide, simple à utiliser et efficace TOPO a été appliqué à de nombreux vecteurs différents pour un large éventail d’applications.
Zero Blunt TOPO Kits de clonage PCR pour options
de kits de séquençage Le Zero Blunt TOPO kit de clonage PCR pour séquençage peut être acheté avec une variété de cellules compétentes qui offrent différents avantages selon vos besoins :

• Clonage général : TOP10 (Catégories K2875-J10, K2875-20, K2875-40)
• Clonage à haute efficacité : TOP10 Electrocomp™ Cellules (cat. No. K2880-20, K2880-40)
• Clonage général, résistance au bactériophage T1 : DH5-T1Rα (Cat. Non. K2895-20)
• Croissance rapide : Mach1-T1R™ E . coli chimiquement compétent (Cat. Non. K2835-20)

• Obtenez plus de séquence : Permet une plus grande séquence d’insertion et moins de séquence vectorielle lors de l’utilisation d’amorces de séquençage standard

• Rapide et facile : Passez du PCR aux clones en seulement 3 étapes et en aussi peu que 5 minutes de jeu manuel
• Efficace : Atteindre jusqu’à 95% de clones avec le bon insert
• Prouvé : Performance fiable depuis plus de dix ans avec plus de 4000 citations

• VECTEUR : pCR4Blunt-TOPO Vecteur : Vecteur de clonage optimisé pour améliorer les résultats de séquençage
• MÉTHODE DE CLONAGE : TOPO Clonage : Ligature de 5 minutes basée sur la topoisomerase I de produits PCR amplifiés par polymérase avec des extrémités émoussées au vecteur
• CELLULES COMPÉTENTES : Diverses options : Choisissez parmi des kits contenant soit des cellules générales, à haute efficacité, résistantes au bactériophage T1, soit des cellules compétentes à croissance rapide

Biologie de la chromatine, immunoprécipitation de la chromatine (ChIP), clonage, analyse de méthylation, clonage par PCR, ARNi, épigénétique et recherche sur les ARN non codants, séquençage de l’ADN traité au bisulfite