Invitrogen™ TOPO™ TA Cloning™ Kit pour le séquençage, sans cellules compétentes

Chaque kit utilise le vecteur pCR™4-TOPO TA avec des sites d’amorce de séquençage spécialement conçus qui retournent plus de séquence d’insertion et moins de séquence vectorielle de chaque réaction, et sont disponibles avec une variété de cellules compétentes, ou pas de cellules compétentes, selon vos besoins et votre budget. Ces kits incluent tout ce qu’il faut pour cloner et sélectionner des vecteurs recombinants contenant votre fragment PCR de choix.

TOPO TA Cloning Kits pour le séquençage : Aperçu
Vector : Vecteur TA pCR4-TOPO : Vecteur de clonage optimisé pour améliorer les résultats
de séquençage Méthode de clonage : TOPO™ Clonage™ TA : Ligature de 5 minutes basée sur la topoisomerase –I de produits PCR avec des surplombs 3'A (Taq-amplifiés) vers le vecteur
Cellules compétentes : Diverses options : choisissez parmi des kits contenant des cellules générales, à haute efficacité, résistantes au bactériophage T1 ou à croissance rapide, ou utilisez votre propre
vecteur TA pCR4-TOPO : optimisé pour le
séquençage Nous avons retiré une grande partie du site de clonage multiple du vecteur TA pCR4-TOPO afin de raccourcir la distance entre les sites d’amorce de séquençage et le site d’insertion à aussi peu que 33 pb. Cela signifie que les réactions de séquençage donnent moins de séquence vectorielle et plus de séquence d’insertion. Le vecteur TA pCR4-TOPO possède des sites pour 4 amorces de séquençage courantes : M13 avant, M13 inverse, T7 et T3. Les kits incluent une aliquote de chaque.
Sélection et manipulation
des clones de TA pCR4-TOPOLe vecteur TA pCR4-TOPO contient à la fois des marqueurs de résistance à l’ampicilline et à la kanamycine ainsi qu’une fusion du gène LacZ-ccdBα pour une sélection positive et un criblage bleu/blanc. Le site de clonage multiple minimisé du vecteur inclut toujours des sites EcoRI adjacents pour une excision simplifiée des produits PCR clonés et un site unique Sse8387I pour la génération de suppressions imbriquées avant le séquençage. T7 et T3 des promoteurs sont également présents pour la transcription in vitro.
Clonage
simplifié basé sur TOPOGrâce à TOPO la technologie de clonage, il n’est pas nécessaire d’utiliser des amorces PCR contenant des séquences spécifiques, post-PCR des procédures, la préparation des vecteurs ou d’autres étapes longues de manipulation de l’ADN. Il suffit d’ajouter votre réaction PCR directement au vecteur chargé par la topoïsomérase fourni, d’incuber 5 minutes, puis de transformer avec les cellules compétentesfournies par E. coli.
Clonage
efficaceAvec jusqu’à 95% des clones portant l’insert désiré, vous pouvez filtrer moins de clones et économiser du temps et de l’argent. Le vecteur TA pCR4-TOPO utilisé dans ce kit est équipé de surplombs 3'T pour une ligation efficace des Taqproduits PCR amplifiés en -amplification, qui contiennent des surplombs 3'A.
La norme en clonage
En matière de clonage, TOPO la technologie du clonage est un partenaire fiable pour des milliers de scientifiques depuis plus de dix ans. Le clonage rapide, simple à utiliser et efficace TOPO a été appliqué à de nombreux vecteurs différents pour un large éventail d’applications.
TOPO TA Cloning Kits pour le séquençage : Options
du kit Le TOPO TA Cloning kit pour le séquençage peut être acheté avec une variété de cellules compétentes qui offrent différents avantages selon vos besoins :

• Clonage général : TOP10 (Cat. No K4575-J10, K4575-01, K4575-40)
• Clonage à haute efficacité : TOP10 Electrocomp™ Cellules (Cat. No K4580-01, K4580-40)
• Clonage général, résistance au bactériophage T1 : DH5-T1Rα (Cat. No K4595-01, K4595-40)
• Croissance rapide : Mach1-T1R™ E . coli chimiquement compétent (Cat. Non. K4530-20)
• Fournissez le vôtre : pour plus de flexibilité et pour économiser de l’argent (Cat. No 450030)

Une version du kit qui inclut un PureLink™ Quick Plasmid Miniprep Kit (Cat. Non. K4575-02) pour une utilisation en isolation de plasmides propres, prêts pour le séquençage, recombinant est également disponible.

• Résistant à l’ampicilline (AmpR) et à la kanamycine (KanR)
• Obtenez plus de séquence : Permet une plus grande séquence d’insertion et moins de séquence vectorielle lors de l’utilisation de amorces de séquençage standard
• Rapide et facile : passez de la PCR aux clones en seulement trois étapes et en seulement 5 minutes de pratique
• Efficace : obtenir jusqu’à 95% de clones avec le bon insert
• Prouvé : performance fiable depuis plus de dix ans avec plus de 4 000 citations

Clonage, clonage PCR