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Invitrogen™ TOPO™ TA Cloning™ Kit pour le séquençage, avec un Shot™ MAX Efficiency™ DH5-T1α R E. coli

Numéro de catalogue. K459540
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Numéro de catalogue. K459540 Fournisseur Invitrogen™ Code fournisseur K459540

Comprend

Topoisomerase I-activated pCR™4-TOPO™ vector; PCR buffer; Salt solution; dNTPs; Control template; T3, T7, M13 forward, and M13 reverse primers; Control PCR primers; Sterile water; One Shot™ Chemically Competent or Electrocomp™ E. coli; S.O.C. medium; Supercoiled pUC19 control plasmid

Fournit une stratégie de clonage en une étape très efficace de 5 minutes (TOPO clonage) pour l’insertion directe de Taq produits PCR amplifiés par polymérase dans un vecteur plasmidique pour le séquençage

Ces kits incluent tout ce qu’il faut pour cloner et sélectionner des vecteurs recombinants contenant votre fragment PCR de choix. Chaque kit utilise le pCR™4-TOPO vecteur TA avec des sites d’amorce de séquençage spécialement conçus qui retournent plus de séquence d’insertion et moins de séquence vectorielle de chaque réaction.
Vecteur TA pCR4-TOPO : Optimisé pour le séquençage
Nous avons retiré une grande partie du site de clonage multiple du vecteur TA pCR4-TOPO afin de raccourcir la distance entre les sites d’amorce de séquençage et le site d’insertion à aussi peu que 33 pb. Cela signifie que les réactions de séquençage donnent moins de séquence vectorielle et plus de séquence d’insertion. Le vecteur TA pCR4-TOPO possède des sites pour quatre amorces de séquençage courantes : M13 avant, M13 marche arrière, T7 et T3. Les kits incluent une aliquote de chaque.
Sélection et manipulation
du clone de TA pCR4-TOPOLe vecteur TA pCR4-TOPO contient à la fois des marqueurs de résistance à l’ampicilline et à la kanamycine ainsi qu’une fusion du gène LacZ-ccdBα pour une sélection positive et un criblage bleu/blanc. Le site de clonage multiple minimisé du vecteur inclut toujours des sites EcoRI adjacents pour une excision simplifiée des produits PCR clonés et un site unique Sse8387I pour la génération de suppressions imbriquées avant le séquençage. T7 et T3 des promoteurs sont également présents pour la transcription in vitro.
Clonage
simplifié basé sur TOPOGrâce à TOPO la technologie de clonage, il n’est pas nécessaire d’utiliser des amorces PCR contenant des séquences spécifiques, post-PCR des procédures, la préparation des vecteurs ou d’autres étapes longues de manipulation de l’ADN. Il suffit d’ajouter votre réaction PCR directement au vecteur chargé par la topoïsomérase fourni, d’incuber 5 minutes, puis de transformer avec les cellules compétentesfournies par E. coli.
Clonage
efficaceAvec jusqu’à 95% des clones portant l’insert désiré, vous pouvez filtrer moins de clones pour économiser du temps et de l’argent. Le vecteur TA pCR4-TOPO utilisé dans ce kit est livré avec des surplombs 3'T pour une ligation efficace des Taqproduits PCR amplifiés à 3'A.
La norme en clonage
En matière de clonage, TOPO la technologie du clonage est un partenaire fiable pour des milliers de scientifiques depuis plus de dix ans. Le clonage rapide, simple à utiliser et efficace TOPO a été appliqué à de nombreux vecteurs différents pour un large éventail d’applications.
TOPO TA Cloning Kits pour options de
de séquençage Le TOPO TA Cloning kit de séquençage peut être acheté avec une variété de cellules compétentes qui offrent différents avantages selon vos besoins :

  • Clonage général : TOP10 (Cat. No. K4575-J10, K4575-01, K4575-40)
  • Clonage à haute efficacité : TOP10 Electrocomp™ Cellules (cat. No. K4580-01, K4580-40)
  • Clonage général, résistance au bactériophage T1 : DH5-T1Rα (cat. No. K4595-01, K4595-40)
  • Croissance rapide : Mach1-T1R™ E . coli chimiquement compétent (Cat. Non. K4530-20)
Une version du kit qui inclut un PureLink™ Quick Plasmid Miniprep Kit (Cat. Non. K4575-02) pour une utilisation en isolation de plasmides propres, prêts pour le séquençage, recombinant est également disponible.

  • Obtenez plus de séquence : Permet une plus grande séquence d’insertion et moins de séquence vectorielle lors de l’utilisation d’amorces de séquençage standard
  • Rapide et facile : Passez du PCR aux clones en seulement trois étapes et en seulement 5 minutes de jeu manuel
  • Efficace : Atteindre jusqu’à 95% de clones avec le bon insert
  • Prouvé : Performance fiable depuis plus de dix ans avec plus de 4 000 citations
TOPO TA Cloning Aperçu des kits pour le séquençage
  • VECTEUR : pCR4-TOPO TA Vecteur : Vecteur de clonage optimisé pour améliorer les résultats de séquençage
  • Méthode de clonage : TOPO TA Cloning Ligature de 5 minutes basée sur la topoisomerase I de produits PCR avec des surplombs 3'A (Taq-amplifiés) au vecteur
  • Cellules compétentes : Diverses options : Choisissez parmi des kits contenant soit des cellules générales, à haute efficacité, résistantes au bactériophage T1, soit des cellules compétentes à croissance rapide

Biologie de la chromatine, immunoprécipitation de la chromatine (ChIP), clonage, analyse de méthylation, clonage par PCR, ARNi, épigénétique et recherche sur les ARN non codants, séquençage de l’ADN traité au bisulfite

Spécifications

Souche bactérienne/de levure DH5α
Méthode de clonage TOPO-TA™
Contenu et stockage Boîte 1 :
• Tampon

• PCR


• T3



°


vectoriel
• Shot™ Electrocomp™



° • activé pCR™4-TOPO™ par I Topoisomerase Solution saline dNTPs Modèle de contrôle, amorces T7, M13 avant et M13 inverses Amorces PCR de contrôle Stockage d’eaustérile à -5 à -30 °C.Tous les réactifs sont stables pendant 6 mois lorsqu’ils sont correctement stockés.Boîte 2 : Un plasmidede contrôle pUC19 à super-enroulement moyen chimiquement compétent ou E. coli E. coli entrepose à -68 à -85 °C.
Format Équipement
À utiliser avec (application) Biologie de la chromatine
Gamme de produit One Shot (Un seul coup)
Type de produit Kit de clonage
Promoteur T7, T3
Quantité 50 réactions
Vector Vecteurs de clonage TOPO-TA

Usage exclusivement réservé à la recherche. Ne pas utiliser dans des procédures de diagnostic.