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Invitrogen™ GeneRacer™ Kit avec SuperScript™ III RT et TOPO TA Cloning™ kit pour le séquençage
Description
Le GeneRacer Kit offre une méthode pour obtenir des extrémités d'ADNc de 5' et 3' de longueur complète en utilisant des séquences d'ADNc connues à partir d'étiquettes de séquences exprimées (EST), d'ADNc soustrait, d'affichage différentiel ou de criblages de bibliothèque. Les produits PCR RACE peuvent être rapidement et facilement clonés en utilisant soit le Zero Blunt TOPO kit de clonage PCR pour le séquençage (produits PCR à extrémité émoussée), soit TOPO TA Cloning le kit de séquençage (produits PCR avec surplombs en A de 3'). En utilisant les protocoles fournis, les extrémités de l’ADNc de transcrits rares (30 copies/cellule) et longs (9 kb) peuvent être amplifiées et séquencées à partir de 1 μg d’ARN total.
- Générez de l’ADNc à partir de transcriptions d’au moins 10 kb de longueur
- Obtenir des transcrits rares de 5' de longueur complète à moins de 30 exemplaires par cellule
- Cloner des extrémités complètes de 5' et 3' pour construire une séquence complète d'ADNc
Clonage, PCR et PCR en temps réel, transcription inverse, bibliothèques d’ADNc et construction de bibliothèques
Order Info
Conditions d’expédition : Glace sèche
Spécifications
Spécifications
| Souche bactérienne/de levure | TOP10 |
| Méthode de clonage | TOPO TA |
| Contenu et stockage | Stockez chaque module comme indiqué : GeneRacer™ module (-20 °C) : • 2 × ml d’eau • stérile 24 μl RNout™ • 6 μl phosphatase intestinale de veau (CIP), tampon PIC, pyrophosphatase acide du tabac (TAP), tampon 10X TAP, T4 ligase ARN, tampon ARN 10X T4 ligase, et 10 mM ATP • 6 × ARN 250 GeneRacer™ ng Oligo ARN • 2 × 1 ml Phénol/Chloroforme • 36 μl Glycogène moule • 200 μl Acétate de sodium (3 m) • 225 μl chacun GeneRacer™ 5′ amorces, 5′ amorces imbriquées, 3′ amorces et 3′ amorces • imbriquées 20 μl Contrôle HeLa ARN total (500 ng/μl) • 15 μl chacune Amorce de contrôle A et amorce de contrôle B.1 SuperScript™ III Module RT (-20 °C) • 6 μl SuperScript™ III Inversé Transcriptase (200 U/μl) • 24 μl 5X Tampon • de première brin 15 μl DTT (0,1 m) • 6 μl RNaseH (2 U/μl) • 6 μl amorces aléatoires (100 ng/μl) • 6 μl GeneRacer™ Oligo dT amorce (900 ng/μl) • 6 μl mélange dNTP (10 mM chacun) 10 S.N.A.P. ™ colonnes (température ambiante) TOPO TA Cloning™ kit pour le séquençage (-20 °C) • Réactifs suffisants et un TOP10 Shot™ E. coli chimiquement compétent (conserver à -80 °C) pour cloner 10 GeneRacer™ Produits PCR; GeneRacer Module (-20 °C), Module SuperScript III RT (-20 °C), E. coli compétent (stocké à -80 °C), S.N.A.P. Colonnes (température ambiante), TOPO TA Cloning Kit pour le séquençage (-20 °C) |
| Format | Équipement |
| À utiliser avec (application) | Transcription inverse |
| Comprend | GeneRacer Module : 2 x 1,5 mL d’eau stérile, 24 μL RNaseOut, 6 μL de phosphatase intestinale de veau (CIP), tampon CIP, pyrophosphatase d’acide du tabac (TAP), 10 x tampon TAP, T4 ligase ARN, 10 T4 tampons ARN ligase, et 10 mM ATP, 6 x 250 GeneRacer ng ARN Oligo, 2 x 1 mL de phénol/chloroforme, 36 μL de glycogène de moule, 200 μL d’acétate de sodium (3M), 225 μL 5 GeneRacer ' amorces, 5' amorces imbriquées, 3' amorces et 3' amorces imbriquées, 20 μL d’ARN total HeLa de contrôle (500 ng/μL), 15 μL de chaque amorce de contrôle A et amorce de contrôle B.1; Module RT SuperScript III : 6 μL SuperScript III Reverse Transcriptase (200U/μL), 24 μL 5X tampon de première brise, 15 μL de DTT (0,1 M), 6 μL RNaseH (2U/μL), 6 μL amorces aléatoires (100 ng/μL), amorce 6 μL Oligo GeneRacer dT (900 ng/μL), 6 μL de mélange dNTP (10 mM chacun), 10 S.N.A.P. colonnes, TOPO TA Cloning kit pour séquençage (-20 °C), réactifs suffisants et E. coli chimiquement compétent en un seul tir TOP10 |
| Gamme de produit | GeneRacer, SuperScript, TA Cloning, TOPO |
| Type de produit | Kit de clonage |
| Quantité | 1 kit |
| Vector | pCR4-TOPO TA |
Usage exclusivement réservé à la recherche. Ne pas utiliser dans des procédures de diagnostic.