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Invitrogen™ pENTR™/TEV/D-TOPO™ Kit de clonage, avec un Shot™ E. coli chimiquement compétent Mach1-T1™ R

Numéro de catalogue. K253520
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Numéro de catalogue. K253520 Fournisseur Invitrogen™ Code fournisseur K253520

Pour de l'aide SVP utiliser la function de clavardage; nous envoyer un couriel à help@thermofisher.com ou appelez le service à la clientèle au 1-800-234-7437.

Description

Comprend

Vecteur pENTR/TEV/D-TOPO, DNTPs, solution saline, eau stérile, amorces universelles de séquençage M13, OneShot MachI T1 résistant chimiquement à E. coli, S.O.C. Un milieu, et un plasmide de contrôle pUC19.

Utilisez une stratégie de clonage très efficace en 5 minutes pour cloner directionnellement un produit PCR à extrémité émoussée en vecteur

  • Les produits PCR à extrémité brute clonent directionnellement dans un vecteur d’entrée pENTR/TEV/D-TOPO avec une efficacité supérieure à 90%, et incluent un site de clivage dépendant de la protéase TEV pour l’élimination des marqueurs N-terminaux des protéines exprimées
  • Transfert rapide de gènes clonés entre plusieurs systèmes vectoriels
  • Performance fiable
  • Pour accéder au système Gateway, la PCR amplifie le gène d’intérêt et ajoute le produit directement au vecteur pENTR/SD/D-TOPO chargé par topoisomerase fourni, incube 5 minutes, puis transforme les cellules compétentes d’E. coli fournies
  • Les clones résultants atL contenant Gateway Entry sont prêts pour une recombinaison efficace avec le choix des vecteurs
  • Le vecteur pENTR/TEV/D-TOPO inclut le site de reconnaissance du virus de la gravure du tabac (TEV) pour le clivage dépendant de la protéase d’une marque N-terminale à partir d’une protéine recombinante
  • Vector possède des sites de séquençage d’amorce M13 et T7 et des sites de recombinaison attL flanquant le site d’insertion de produit PCR, permettant de vérifier facilement la séquence et de recombiner les clones pour choisir des vecteurs de destination attR contenant la passerelle
  • Le gène de résistance à la kanamycine et l’origine pUC sont utilisés pour la sélection et la propagation à haute puissance dans E. coli
  • Surplomb de quatre bases sur des paires de vecteurs avec une séquence de quatre bases conçue en amorce avant utilisée en réaction PCR pour fournir la directionnalité à la réaction de ligature par topoïsomérase

Clonage, clonage Gateway

Spécifications

Méthode de clonage Directionnel TOPO™
Contenu et stockage ™ ⁄Le kit de clonage pENTR TEV⁄D-TOPO™ contient un vecteur pENTR⁄TEV⁄D-TOPO™, des dNTP, une solution saline, de l’eau stérile, des amorces universelles de séquençage M13, OneShot™ MachI™ un produit chimiquement résistant à la T1 Chemically E. coli, S.O.C. Un milieu, et un plasmide de contrôle pUC19. Stockez E. coli compétent à -80 °C. Stockez tous les autres composants à -20 °C.
Nb de réactions 20 réactions
Gamme de produit One Shot (Un seul coup)
Type de produit TOPO Kit de clonage
Étiquette de la protéine N-Terminal
Quantité 20 réactions
Vector pENTR

Usage exclusivement réservé à la recherche. Ne pas utiliser dans des procédures de diagnostic.