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Invitrogen™ pENTR™/SD/D-TOPO™ Kit de clonage, avec un Shot™ E. coli chimiquement compétent Mach1-T1™ R

Numéro de catalogue. K263520
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Numéro de catalogue. K263520 Fournisseur Invitrogen™ Code fournisseur K263520

Pour de l'aide SVP utiliser la function de clavardage; nous envoyer un couriel à help@thermofisher.com ou appelez le service à la clientèle au 1-800-234-7437.

Description

Comprend

Vecteur prêt à l’emploi TOPO , dNTPs, solution saline, eau stérile, amorces universelles de séquençage M13, TOP10 ouMach1-T1 R chimiquement E. coli, S.O.C. Un milieu, et un plasmide de contrôle pUC19.

Utilisez une stratégie de clonage très efficace en 5 minutes pour cloner directionnellement un produit PCR à extrémité émoussée en vecteur

  • Les produits PCR à extrémité émoussée clonent directionnellement en pENTR™/SD/D-TOPO™ vecteur d’entrée avec une efficacité supérieure à 90%, et incluent la séquence Shine-Dalgarno en amont pour l’expression chez les procaryotes
  • Transfert rapide de gènes clonés entre plusieurs systèmes vectoriels
  • Performance fiable
  • Pour accéder au système Gateway, la PCR amplifie le gène d’intérêt et ajoute le produit directement au vecteur chargé pENTR™ en topoisomerase / SD/SD D-TOPO fourni, incube 5 minutes et transforme les cellules d’E. coli compétentes fournies
  • Les clones résultants contenant attL sont prêts pour une recombinaison efficace selon votre choix de vecteurs
  • pENTR™ Le vecteur /SD SD/SD D-TOPO™ inclut l’amplificateur translationnel du gène T7 10 et le site de liaison du ribosome (RBS) pour une expression optimale de la protéine native après recombinaison avec des vecteurs procaryotes
  • Utilisez aussi un vecteur pour l’expression dans d’autres systèmes hôtes par recombinaison avec différents vecteurs de destination
  • Vector possède des sites de séquençage d’amorces M13 et T7 et des sites de recombinaison attL flanquant le site d’insertion du produit PCR, permettant de vérifier facilement les clones en séquences et de recombiner en choix de vecteurs de destination attR
  • Un gène de résistance à la kanamycine et une origine pUC sont utilisés pour la sélection et la propagation à haute copie chez E. coli
  • Pas de nettoyage PCR, de préparation du vecteur ou d’autres étapes longues de manipulation de l’ADN
  • Surplomb de quatre bases sur des paires de vecteurs avec une séquence de quatre bases conçue en amorce avant utilisée lors de la réaction PCR pour fournir la directionnalité à la réaction de ligature topoïsomérase

Clonage, clonage Gateway

Spécifications

Méthode de clonage Directionnel TOPO™
Contenu et stockage Chaque kit de clonage TOPO™ pENTR directionnel contient le vecteur approprié prêt à l’emploi TOPO™ , des dNTP, une solution saline, de l’eau stérile, des amorces universelles de séquençage M13, TOP10 ouMach1-T1 R chimiquement E. coli, S.O.C. Un milieu, et un plasmide de contrôle pUC19. Stockez E. coli compétent à -80 °C. Stockez tous les autres composants à -20 °C.
Nb de réactions 20 réactions
Gamme de produit One Shot (Un seul coup)
Type de produit TOPO Kit de clonage
Quantité 20 réactions
Vector pENTR

Usage exclusivement réservé à la recherche. Ne pas utiliser dans des procédures de diagnostic.