Invitrogen™ Bac-to-Bac™ C-son TOPO™ kit de clonage

Bac-to-Bac™ L’expression du baculovirus est une méthode efficace pour produire un baculovirus destiné à une expression protéique de haut niveau dans les cellules d’insectes. Il repose sur la génération de virus recombinant par transposition spécifique à un site dans E. coli plutôt que sur la recombinaison homologue dans les cellules d’insectes. Nouveau : pFastBacTOPO™ vecteurs!


Expression
fiable et rapide des protéines Le Bac-to-Bac™ système d’expression du baculovirus est plus rapide et facile que l’expression traditionnelle du baculovirus, et il maintient des niveaux élevés d’expression protéique. Bac-to-Bac™ repose sur la génération de baculovirus recombinant par transposition spécifique à un site chez E. coli plutôt que sur la recombinaison homologue dans les cellules d’insectes. Le système d’expression Bac-to-Bac™ du Baculvirus est très apprécié dans la littérature académique. Environ 100 citations chaque année depuis 2000!

Les systèmes baculovirus traditionnels nécessitent la purification et l’amplification d’un surnageant viral initial à faible titre. Cela nécessite un test de plaque qui prend du temps. Le vecteur Bac-à-Bac™ pFastBac™, cependant, se recombine avec le bacmide parent dans DH10Bac™ les cellules compétentes d'E. coli pour former un bacmide d'expression. Transfecter le bacmide dans des cellules d’insectes pour une production rapide d’un titre élevé de particules pures de baculovirus recombinant lors de la toute première transfection. Vous économiserez des semaines de temps précieux. Collectez un stock pur de baculovirus P2 au jour 10 sans nécessiter un test de plaques fastidieux (voir Figure 1).

Un criblage
pFastBac™ à haute expression et facile utilise le puissant promoteur de polyédrine pour générer des niveaux élevés d’expression dans diverses lignées cellulaires d’insectes telles que Sf9, Sf21 et High Five™ cellules.

Nouveautés :
Les vecteurs de Bac-à-Bac™ sont maintenant aussi disponibles comme pFastBacTOPO™ vecteurs. pFastBacTOPO™ Les vecteurs sont TOPO™ Blunt™ des vecteurs et sont fournis en Mach1-T1R™ E. coli pour faciliter le clonage et la propagation du GOI de pFastBac⁄ pFastBac. Les nouveaux vecteurs vous permettent de :

Amplifiez votre gène d’intérêt (GOI) avec une enzyme PCR de la plus haute fidélité comme Accuprime™ Pfx SuperMix.

TOPO™ clonez le produit PCR à bout émoussé dans le nouveau vecteur en seulement 5 minutes!

Visualisez les colonies 8 heures après le placage sur des plaques sélectives d’ampicilline, car les cellules Mach1-T1R™ d’E. coli ont un temps de doublement plus rapide comparé aux autres souches de clonage standard.

Avec le kit de clonage ou d’expression C-His TOPO™, vous pouvez produire une protéine de fusion Him C-terminale avec un site de clivage TEV à purifier avec des résines chélantes de nickel (système de purification d’Invitrogen ProBond™ ’) et générer une protéine native à l’aide de la populaire AcTEV™ protéase d’Invitrogen’. Bac-to-Bac™ C’est le seul vecteur d’Invitrogen’qui contient un site de clivage TEV en C-terminal!

Les nouveaux vecteurs combinent la TOPO™ technologie de clonage avec les fonctionnalités très reconnues Bac-to-Bac™ d’expression du baculovirus pour permettre un clonage facile et une expression protéique de haut niveau.
Les pFastBacTOPO™ vecteurs sont offerts sous forme de kits de clonage et d’expression.