Invitrogen™ Réactifs de fragmentation de l’ARN

Le protocole est simple, rapide et peut être complété en moins de 20 minutes. Des réactifs suffisants Invitrogen™ sont inclus pour 200 rxns. De nombreux protocoles d’utilisation d’ARN amplifié dans l’analyse de microarrays recommandent de fragmenter l’ARNa avant l’hybridation avec un microarray oligonucléotidique. Cette étape de fragmentation améliore la cinétique d’hybridation avec les oligonucléotides en réseau et peut mener à un signal accru. Le protocole est simple. Mélangez l’ARNa avec le réactif de fragmentation d’ARN Invitrogen 10X et chauffez à 70 °C pendant 15 minutes. La réaction est ensuite arrêtée par l’ajout de la solution d’arrêt et placée sur glace jusqu’à ce qu’elle soit prête à être hybridée avec le microréseau. La taille moyenne des fragments résultants sera de 60 à 200 nucléotides. Jusqu’à 10 μg d’ARN peuvent être fragmentés dans un rxn de 10 μL.

Analyse de l’expression génique et génotypage, analyse de microarrays